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1、目的:初步探討松節(jié)藻乙醇提取物不同分離部位(石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物)對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用及對(duì)糖尿病小鼠的影響。
方法:采用體外實(shí)驗(yàn)、體內(nèi)實(shí)驗(yàn)相結(jié)合的方法:體外實(shí)驗(yàn)采用對(duì)硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)法,α-葡萄糖苷酶可以促進(jìn)對(duì)硝基苯基-α-D-吡喃葡萄糖苷(PNPG)的水解生成對(duì)硝基苯酚(PNP),利用高效液相色譜法測(cè)定反應(yīng)體系中對(duì)硝基苯酚(PNP)的含量,可計(jì)算出松節(jié)藻乙醇提取物不同分離部
2、位(石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物)及阿卡波糖對(duì)α-葡萄糖苷酶體外抑制率,并通過軟件計(jì)算出IC50值;體內(nèi)實(shí)驗(yàn)用昆明種小鼠,松節(jié)藻乙醇提取物不同分離部位(石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物)、阿卡波糖灌胃給藥,從小鼠尾部靜脈采血,測(cè)小鼠血糖值,通過血糖值可直接反應(yīng)出松節(jié)藻乙醇提取物不同分離部位(石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物)對(duì)正常小鼠糖耐量、對(duì)氧嘧啶模型小鼠糖耐量、對(duì)小鼠空腹血糖及小鼠體重的影響;通過黃嘌呤氧
3、化酶法、硫代巴比妥酸(TBA)法測(cè)松節(jié)藻乙醇提取物不同分離部位(石油醚提取物、氯仿提取物、乙酸乙酯提取物)對(duì)四氧嘧啶小鼠血清中SOD活性和MDA的水平影響。
結(jié)果:松節(jié)藻石油醚提取物、松節(jié)藻氯仿提取物體外對(duì)α-葡萄糖苷酶的抑制作用很弱,而松節(jié)藻乙酸乙酯提取物體外對(duì)α-葡萄糖苷酶具有較強(qiáng)的抑制作用,IC50為3.12mg/ml,陽(yáng)性對(duì)照藥α-葡萄糖苷酶抑制劑拜糖平IC50為2.18mg/ml。小鼠體內(nèi)降血糖活性研究表明:對(duì)正常小
4、鼠糖耐量影響、氧嘧啶模型小鼠糖耐量影響顯示,松節(jié)藻石油醚提取物組、松節(jié)藻氯仿提取物組無(wú)明顯差異,而松節(jié)藻乙酸乙酯提取物能夠顯著降低小鼠給淀粉后0.5h、1h血糖值(P<0.01);對(duì)正常小鼠空腹血糖的影響顯示,松節(jié)藻石油醚提取物組、松節(jié)藻氯仿提取物組、松節(jié)藻乙酸乙酯組血糖均無(wú)明顯變化,說明對(duì)正常小鼠空腹血糖無(wú)明顯影響;對(duì)四氧嘧啶小鼠空腹血糖的影響顯示,松節(jié)藻石油醚提取物組、松節(jié)藻氯仿提取物組沒有明顯影響,而乙酸乙酯組在第20d血糖已顯著
5、降低(P<0.01);對(duì)四氧嘧啶小鼠體重的影響顯示:松節(jié)藻石油醚提取物組、松節(jié)藻氯仿提取物組小鼠體重下降,而松節(jié)藻乙酸乙酯提取物組小鼠體重增加;對(duì)四氧嘧啶小鼠血清中SOD活性和MDA水平的影響顯示,松節(jié)藻乙酸乙酯提取物能夠提升四氧嘧啶小鼠血清中的SOD活性,降低MDA的水平(P<0.05),具有抗氧化作用,而石油醚提取物和氯仿提取物則效果不顯著。
結(jié)論:松節(jié)藻乙酸乙酯提取物體外對(duì)α-葡萄糖苷酶具有較強(qiáng)的抑制作用;松節(jié)藻乙酸乙酯
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