ALK1在小鼠胰腺中的表達(dá)與定位研究.pdf

1、胰腺是重要的消化和內(nèi)分泌器官，分為外分泌部和內(nèi)分泌部兩部分。外分泌部由腺泡和導(dǎo)管組成，其分泌的胰液有重要的消化作用。散布在腺泡之間的胰島(isletofLangerhans)構(gòu)成內(nèi)分泌部，可分泌多種激素。成熟胰島主要含有α細(xì)胞、β細(xì)胞、δ細(xì)胞、γ細(xì)胞四種細(xì)胞類型，分別分泌胰高血糖素(glucagon)、胰島素(insulin)、生長抑素(somatostatin)和胰多肽(pancreaticpolypeptide)，它們對(duì)體內(nèi)的糖代謝

2、和血糖平衡發(fā)揮重要的調(diào)控作用。 近年來，由于糖尿病、胰腺癌等胰腺疾病在世界范圍內(nèi)的發(fā)病率不斷上升，有關(guān)胰腺發(fā)育的分子調(diào)控機(jī)制的研究越來越受關(guān)注。胰腺的發(fā)育是一個(gè)高度協(xié)調(diào)的過程，受到多種信號(hào)通路的共同調(diào)控。Transforminggrowthfactor-β(TGF-β)信號(hào)通路是其中一類重要的調(diào)控通路。迄今為止，已經(jīng)有大量文獻(xiàn)報(bào)道該信號(hào)通路在胰腺發(fā)育和胰腺疾病中的調(diào)控作用，但是其中的具體作用機(jī)制至今還不清楚。ALK1(acti

3、vinreceptor-likekinase1；ACVRL1)是TGF-β信號(hào)通路中的一種Ⅰ型單跨膜絲氨酸/蘇氨酸激酶受體。在TGF-β信號(hào)通路中，能夠與TGF-β1或TGF-β3結(jié)合，通過活化某些Smads蛋白傳遞信號(hào)?，F(xiàn)有研究發(fā)現(xiàn)ALK1主要表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞，參與調(diào)控血管發(fā)生發(fā)育過程。至今尚無關(guān)于它在胰腺細(xì)胞中表達(dá)的任何報(bào)道。我們認(rèn)為，從TGF-β信號(hào)通路的重要受體——ALK1著手進(jìn)行研究，對(duì)于進(jìn)一步認(rèn)識(shí)該信號(hào)通路在胰腺發(fā)育調(diào)控中的作

4、用途徑和機(jī)理尤為重要。 本實(shí)驗(yàn)以C57BL/6J小鼠12.5天-16.5天，18.5天的胚胎、新生和出生后5周的小鼠為研究材料，制作石蠟切片，通過免疫組織化學(xué)染色和免疫熒光共定位技術(shù)，用抗體Rabbitpolyclonalanti-acvrl1和Polyclonalguineapiganti-swineinsulin檢測并定位基因alk1在小鼠胰腺中的表達(dá)和發(fā)育變化。 結(jié)果顯示，ALK1在小鼠胚胎12.5天的胰腺中沒

5、有表達(dá)，13.5-16.5天、18.5天、新生及出生5周時(shí)均在胰腺中有特異性表達(dá)，且表達(dá)量隨著胰腺發(fā)育階段的變化而逐漸增多；共定位分析顯示ALK1與INSULIN表達(dá)位置基本一致。 為了進(jìn)一步確定上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，我們用另一種ALK1抗體Rabbitpolyclonalanti-TGFβRI(V-22)與Polyclonalguineapiganti-swineinsulin共染新生小鼠的胰腺組織切片，免疫熒光共定位結(jié)果顯示，二者