高遷移率族蛋白1促進丙型肝炎病毒復制的機制研究.pdf

1、丙型肝炎病毒(HCV)病毒體呈球形，為單股正鏈RNA病毒，HCV感染可發(fā)展為慢性肝炎，肝硬化甚至肝癌。目前針對HCV感染尚無有效的保護性疫苗，并且針對HCV感染的治療手段仍然有限。以往的報道證實許多宿主因子可能涉及丙型肝炎的發(fā)病機理，例如:La抗原，多聚胞嘧啶結合蛋白2(PCBP2)等。
　　高遷移率族蛋白1(HMGB1)作為高遷移率族蛋白家族的成員之一，是一種非組蛋白核蛋白。HMGB1由兩個同源DNA結合結構域和一個高度帶負電荷

2、的羧基端結構域組成，有報道表明HMGB1可以結合DNA，也可結合雙鏈RNA和免疫性RNA作為核酸介導的先天性免疫反應廣泛傳感器。盡管在最近報道稱由病毒感染的細胞釋放出來的HMGB1可阻止HCV感染，但細胞內的HMGB1在HCV復制和（或）翻譯中所起的作用并不知道。
　　在本課題中，我們研究了高速遷移族蛋白1對HCV復制和翻譯的影響。我們發(fā)現(xiàn)在HCV感染的細胞中，過表達HMGB1時，HCV的RNA水平和蛋白水平隨之顯著性的升高;敲除

3、HMGB1時，HCV的RNA水平和蛋白水平也隨之顯著性的降低。隨后，我們運用HCV雙順反子質粒系統(tǒng)(pRL-HL)和HCV IRES RNA報告系統(tǒng)探討HMGB1對HCV翻譯的影響，結果表明HMGB1不作用于HCV的翻譯過程。免疫熒光結果顯示HCV感染的肝細胞中HMGB1由胞核轉移至胞質，通過免疫沉淀和RNA結合蛋白免疫共沉淀實驗證實，HMGB1與HCV正鏈RNA結合。進一步的實驗表明:HMGB1是通過A box結構域與HCV5'UTR