抗菌肽真核表達(dá)載體pVAX1-ABPS1在人工荷瘤裸鼠基因治療中的效應(yīng)研究.pdf

1、抗菌肽(AntibacterialPeptide)又被稱之為抗微生肽，是生物體天然免疫防御系統(tǒng)的重要組成部分，廣泛的分布于細(xì)菌及各種動(dòng)植物體內(nèi)?？咕氖且活惒粌H具有廣譜抗菌作用，還具有殺死一些真菌、病毒、腫瘤細(xì)胞和實(shí)體瘤等作用的小肽類物質(zhì)。為了研究抗菌肽的抗腫瘤活性，本文利用已經(jīng)構(gòu)建的抗菌肽真核表達(dá)載體pVAX1-ABPS1進(jìn)行人工荷瘤裸鼠的基因治療研究，以確證其體內(nèi)抗腫瘤的效應(yīng)和毒副作用，為進(jìn)一步研究新型抗腫瘤藥物奠定基礎(chǔ)。

2、本實(shí)驗(yàn)分別在療效、治療劑量及對(duì)人腦膠質(zhì)瘤(U251)與人子宮頸癌瘤(HeLa)的治療效果的比較三個(gè)方面進(jìn)行了研究。 首先進(jìn)行療效實(shí)驗(yàn)，在成功建立了U251荷瘤裸鼠模型后，隨機(jī)分為3組，每組5只，分別為治療組、空載體組和對(duì)照組。治療組和空載體組每只小鼠每天瘤內(nèi)注射10μg重組質(zhì)粒pVAX1-ABPS1和10μg空載體pVAX1，連注7天。對(duì)照組每天注射等量PBS，隔日觀察裸鼠腫瘤的大小變化及生存狀態(tài)。結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)組的瘤重明顯小于

3、對(duì)照組(p＜0.05)。取腫瘤組織、肝臟、肺臟等器官進(jìn)行病理學(xué)觀察，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組腫瘤組織的細(xì)胞間隙增大，結(jié)合不緊密，不同程度的點(diǎn)狀、片狀壞死。而肝臟、肺臟等組織器官無明顯病理損傷。提取腫瘤組織總RNA，進(jìn)行RT-PCR檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)了特異性247bp的ABPS1基因片段，表明ABP在腫瘤組織中進(jìn)行了表達(dá)。 隨后進(jìn)行最佳治療劑量實(shí)驗(yàn)，以HeLa荷瘤裸鼠為模型，實(shí)驗(yàn)分5組，每組5只，分別為對(duì)照組和1μg、5μg、10μg、15μg劑

4、量組，實(shí)驗(yàn)組每只小鼠每天瘤內(nèi)注射一定劑量的重組質(zhì)粒pVAX1-ABPS1，連注7天。結(jié)果表明，瘤內(nèi)注射15μg重組質(zhì)粒組與對(duì)照組相比，瘤重差異顯著(p＜0.05)。 另外，本文還對(duì)U251與HeLa兩種人工荷瘤裸鼠的治療效果進(jìn)行了比較，共分4組，每組5只。實(shí)驗(yàn)組每只小鼠每天瘤內(nèi)注射重組質(zhì)粒pVAX1-ABPS115μg，連注7天。結(jié)果表明，該載體對(duì)人腦膠質(zhì)瘤的抑瘤率為36％，對(duì)人子宮頸癌瘤的抑瘤率為38％。上述結(jié)果均表明，將抗菌