節(jié)旋藻形態(tài)建成相關(guān)蛋白（SMR1）的分子特征及抗體制備.pdf

1、浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文節(jié)旋藻形態(tài)建成相關(guān)蛋白（SMR1）的分子特征及抗體制備姓名：陳曉燕申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物物理學(xué)指導(dǎo)教師：汪志平20060501際需要。奪研究應(yīng)用轉(zhuǎn)基因原核表達(dá)策略，通過(guò)對(duì)目的蛋白誘導(dǎo)溫度與時(shí)間等表達(dá)條件優(yōu)化，并應(yīng)用鎳親和層析等分離搜術(shù)獲得了足量、電泳純的SMRj產(chǎn)物。其中，所構(gòu)建的表達(dá)頃粒中目的蛋白誘導(dǎo)表達(dá)的適宜溫度為25～30℃、時(shí)問(wèn)為612h。同時(shí)，進(jìn)～步以原核表達(dá)所獲得的SMRl為抗原，通過(guò)免疫黑眼純種新

2、西蘭兔制備抗體。菇進(jìn)行了4次免疫，每次免疫的蛋白量依次為】、05、O5和O5mg。晟后一次免疫結(jié)束兩同后，頸動(dòng)脈放血并收集血清。通過(guò)間接EI_，ISA捌Westernblot對(duì)所制抗體的特異性和效價(jià)等分析表明，效價(jià)高達(dá)1：51200，日均能與原核表達(dá)的SMRl，以及節(jié)旋藻中的SMRl發(fā)生免疫反應(yīng)。這說(shuō)明所制備SMRl抗體的效價(jià)高、特異性好，從而為進(jìn)一步利用免疫共沉淀、蛋白質(zhì)互作、蛋向質(zhì)芯片等技術(shù)深入研究并揭示SMR1對(duì)節(jié)旋藻形態(tài)建成的生