針刺對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠外周血清SOD、MDA、miRNA-126及VEGF表達(dá)的影響.pdf

1、目的:
　　在前期研究工作的基礎(chǔ)上，以線栓法制備大鼠腦缺血再灌注損傷(cerebralischemia reperfusion injury，CIRI)模型，檢測(cè)外周血清中氧化應(yīng)激相關(guān)蛋白SOD、MDA和血管再生相關(guān)miRNA-126、VEGF表達(dá)的情況，探討針刺百會(huì)和足三里穴對(duì)腦缺血再灌注損傷大鼠的干預(yù)作用，為針刺治療缺血性腦血管病進(jìn)一步提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　采用隨機(jī)數(shù)字表法將SD大鼠分為假手術(shù)組、模型

2、組、針刺組和藥物組，各組大鼠再根據(jù)再灌注后時(shí)間隨機(jī)分為1d、3d、5d和7d4個(gè)時(shí)間點(diǎn)。以右側(cè)大腦中動(dòng)脈線栓法制備腦缺血再灌注損傷模型，用5級(jí)分類法對(duì)大鼠進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分。針刺組為造模成功后在規(guī)定時(shí)間內(nèi)針刺百會(huì)和左足三里穴;藥物組為造模成功后腹腔注射依達(dá)拉奉。應(yīng)用TTC染色法驗(yàn)證模型。用黃嘌呤氧化酶法測(cè)血清SOD活力;硫代巴比妥酸(TBA)法檢測(cè)血清MDA含量;實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)血清miRNA-126的表達(dá);ELISA法檢測(cè)血清V

3、EGF的表達(dá)情況。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果
　　1.TTC染色:假手術(shù)組雙側(cè)腦組織呈鮮紅色，未見缺血性改變;腦缺血再灌注損傷模型組右側(cè)大腦中動(dòng)脈供血區(qū)域腦組織可見到白色的梗死灶，與鮮紅色的正常腦組織形成對(duì)比。
　　2.血清SOD活性:模型組SOD活性降低，3d時(shí)間點(diǎn)最低;除針刺組1d時(shí)間點(diǎn)外，模型組SOD活性顯著低于同時(shí)間點(diǎn)的針刺組和藥物組;針刺組SOD活性低于同時(shí)間點(diǎn)的藥物組。
　　3.血清MDA含量:模型組MDA含量升

4、高，3d時(shí)間點(diǎn)最高，高于同時(shí)間點(diǎn)的針刺組和藥物組;針刺組MDA含量高于同時(shí)間點(diǎn)的藥物組。
　　4.血清miRNA-126表達(dá):模型組miRNA-126表達(dá)升高，3d時(shí)間點(diǎn)達(dá)高峰，高于同時(shí)間點(diǎn)的針刺組和藥物組;除1d時(shí)間點(diǎn)外，針刺組miRNA-126表達(dá)高于同時(shí)間點(diǎn)的藥物組。
　　5.血清VEGF表達(dá):模型組VEGF表達(dá)升高，3d時(shí)間點(diǎn)達(dá)高峰，高于同時(shí)間點(diǎn)的針刺組和藥物組;針刺組VEGF表達(dá)高于同時(shí)間點(diǎn)的藥物組。
　　結(jié)

5、論:
　　1.針刺大鼠百會(huì)、足三里穴可能通過上調(diào)SOD、下調(diào)MDA表達(dá)干預(yù)腦缺血再灌注損傷后氧化應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化過程。
　　2.針刺大鼠百會(huì)、足三里穴可能通過下調(diào)miRNA-126及VEGF的表達(dá)干預(yù)腦缺血再灌注損傷后血管再生。
　　3.本實(shí)驗(yàn)研究針刺組療效顯著優(yōu)于模型組，差于藥物組;但是針刺具有操作簡(jiǎn)便，費(fèi)用低廉，無毒副作用等特點(diǎn)。
　　創(chuàng)新點(diǎn):
　　以線栓法成功復(fù)制了經(jīng)典的腦缺血再灌注損傷大鼠模型，根據(jù)