用ReaL-Time qPCR方法檢測(cè)人心房和心室肌組織中成纖維細(xì)胞生長因子同源性因子mRNA的表達(dá)特征.pdf

1、成纖維細(xì)胞生長因子同源因子(Fibroblast growth factor homologousfactors，F(xiàn)HFs)是成纖維細(xì)胞生長因子(Fibroblast Growth Factor，F(xiàn)GF)家族中一種特殊的亞家族，目前主要有FHF1(FGF12)、FHF2(FGF13)、FHF3(FGF11)、FHF4(FGF14)四類，由于可以和細(xì)胞內(nèi)鈉離子通道結(jié)合，影響通道的表達(dá)和功能，因此研究FHFs在人心肌組織中的表達(dá)具有重要生理

2、學(xué)意義，本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用實(shí)時(shí)RT-PCR技術(shù)，檢測(cè)人心房和心室肌組織中FHFs各亞型mRNA的相對(duì)表達(dá)含量。
　　目的:建立檢測(cè)人心房和心室肌組織中成纖維細(xì)胞生長因子同源因子（FHFs）mRNA的實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法，檢測(cè)人心房和心室肌組織中FHFs的各亞型mRNA的表達(dá)特征。
　　方法:取正常人心房肌和心室肌組織，分別用Trizol法裂解，提取mRNA，用體外反轉(zhuǎn)錄技術(shù)得到其cDNA，繼而用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(real-tim

3、e qPCR)方法，以cDNA為模版，用FHFs各亞型特異性引物進(jìn)行擴(kuò)增，測(cè)定FHFs各亞型mRNA在心房肌和心室肌中的相對(duì)含量，并用瓊脂糖凝膠電泳方法對(duì)qPCR產(chǎn)物做定性觀測(cè)。
　　結(jié)果:人心房肌組織中，以FGF12B的表達(dá)占優(yōu)，其余亞型僅為其表達(dá)量的4％或更低;在人心室肌中，以FGF12B的表達(dá)占優(yōu)，F(xiàn)GF13VY/Y表達(dá)約為FGF12B的26.7±9％，其余亞型均表達(dá)量很低。
　　結(jié)論:在人心房和心室肌組織中，相比于其