版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、IGFBP—6是IGF—II的高親和力結(jié)合蛋白,對IGF—II活性具有重要的調(diào)節(jié)作用。IGFBP—6所具有的抑制IGF—II促腫瘤生長活性的作用已經(jīng)在很多腫瘤細(xì)胞系中得到了證實(shí)。隨著研究的深入,IGFBP家族越來越多的生物學(xué)活性受到了人們的重視。IGFBP—6在體內(nèi)廣泛的分布及其與IGF—II的特殊關(guān)系表明對其活性的研究具有重要的意義。本論文的研究工作從以下方面對IGFBP—6的功能進(jìn)行了研究。
首先在原核表達(dá)體系中表達(dá)了
2、重組人IGFBP—6及其C端,分離純化得到了足夠純度的蛋白產(chǎn)品,檢測了重組人IGFBP—6抑制IGF—II促腫瘤細(xì)胞生長的活性,并對IGFBP—6及其C端獨(dú)立于IGF的生物學(xué)活性做了初步的研究。
1.成功構(gòu)建了原核表達(dá)載體pET—30b—IGFBP—6和pET—30b—IGFBP—6—C,轉(zhuǎn)化.E.coli感受態(tài)細(xì)胞,篩選到了高表達(dá)量的菌株,優(yōu)化了表達(dá)條件。
2.成功分離純化了可溶性表達(dá)的IGFBP—6及其C
3、端,得到純度大于90%的目的蛋白。
3.檢測了IGFBP—6抑制IGF—II促腫瘤細(xì)胞A549增殖的活性。
4.檢測了IGFBP—6及其C端單獨(dú)也可以抑制PC—3M細(xì)胞的生長,證實(shí)IGFBP—6具有不依賴IGF—II的生物活性,且進(jìn)一步明確該作用位點(diǎn)就在其C端。
另外,用本室保存的pEGF—C1—IGFBP—6的質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染PC—3M細(xì)胞,根據(jù)綠色熒光強(qiáng)度在細(xì)胞核和細(xì)胞漿中的比例,確定了IGFB
4、P—6在細(xì)胞核中是有分布的:且構(gòu)建了pEGFP—C1—BP6—nls和pEGFP—C1—BP6—mut兩個(gè)真核轉(zhuǎn)染質(zhì)粒,明確了IGFBP—6的核定位相關(guān)序列;并通過Annexin V—EGFP和PI雙染凋亡檢測試劑盒檢測了過表達(dá)IGFBP—6的PC—3M的凋亡,為進(jìn)一步研究IGFBP—6的非IGF依賴的生物學(xué)活性提供了理論依據(jù)。
通過上述工作,首先在原核表達(dá)體系中表達(dá)并分離純化到可用于后續(xù)試驗(yàn)的IGFBP—6及其C端,檢測
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6的功能研究.pdf
- 胰島素樣生長因子-1、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-1相關(guān)研究.pdf
- 星形細(xì)胞瘤患者血清胰島素樣生長因子-Ⅰ及胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-Ⅱ表達(dá)水平及臨床意義.pdf
- 膠質(zhì)瘤中胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP-2)基因的作用研究.pdf
- 胰島素樣生長因子-1、胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3及瘦素與巨大兒的相關(guān)性.pdf
- 豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1~6基因核苷酸變異的研究.pdf
- 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-4(IGFBP-4)基因的克隆、表達(dá)與蛋白純化.pdf
- 瘢痕疙瘩中胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3的表達(dá).pdf
- 轉(zhuǎn)基因水稻中表達(dá)胰島素樣生長因子IGF-I及其結(jié)合蛋白IGFBP-3的研究.pdf
- 40530.nfκb參與低氧下高原動物類胰島素樣生長因子ⅰ類胰島素生長因子結(jié)合蛋白1igfⅰigfbp1的表達(dá)
- 肝細(xì)胞生長因子和類胰島素樣生長因子對心肌干細(xì)胞的誘導(dǎo)作用.pdf
- 胰島素樣生長因子1及其結(jié)合蛋白3對胃癌診斷的意義.pdf
- 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-3在瘢痕疙瘩中的表達(dá)及作用.pdf
- 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白7通過調(diào)控TGF-β1信號通路抑制HaCaT細(xì)胞生長.pdf
- 類胰島素生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)的作用機(jī)制及功能進(jìn)化研究.pdf
- [教育]胰島素樣生長因子1的相關(guān)研究
- 生長激素治療宮內(nèi)發(fā)育遲緩矮小患兒的療效與胰島素生長因子-1、胰島素生長因子結(jié)合蛋白-3的關(guān)系.pdf
- 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白2(IGFBP2)在鵝肥肝形成中的作用及相關(guān)機(jī)制研究.pdf
- 胰島素樣生長因子IImRNA結(jié)合蛋白3在膀胱移行細(xì)胞癌的表達(dá)及意義.pdf
- 胰島素樣生長因子Ⅰ及其受體對卵母細(xì)胞成熟的影響.pdf
評論
0/150
提交評論