DAla2GIP對(duì)APP-PS1轉(zhuǎn)基因小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨損傷保護(hù)效應(yīng)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　1、觀察APP/PS1雙轉(zhuǎn)基因小鼠發(fā)生膝關(guān)節(jié)軟骨損傷的嚴(yán)重程度；
　　2、觀察探討GIP類似物DAla2GIP對(duì)APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠膝關(guān)節(jié)軟骨損傷的保護(hù)效應(yīng)及潛在機(jī)制。
　　方法：
　　將12只9月齡雄性C57為背景的APP/PS1小鼠和12只雄性同窩野生型小鼠隨機(jī)分為野生型對(duì)照組；野生型DAla2GIP治療組；APP/PS1轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M和轉(zhuǎn)基因治療組，每組6只，野生型與轉(zhuǎn)基因治療組小鼠分別腹腔給

2、予1nmol/ml DAla2GIP0.2 ml/d，連續(xù)30天，野生型與轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M小鼠分別腹腔給予同體積0.01MPBS。30天后，1％乙醚麻醉小鼠后分別取小鼠靜脈血，腦組織和膝關(guān)節(jié)股骨關(guān)節(jié)面進(jìn)行ELISA、免疫組織化學(xué)，免疫熒光等實(shí)驗(yàn)研究。
　　結(jié)果：
　　1、小鼠膝關(guān)節(jié)HE染色結(jié)果顯示各組小鼠關(guān)節(jié)軟骨小而薄，沒(méi)有典型的四層結(jié)構(gòu)，鈣化區(qū)不明顯。
　　2、番紅“O”及甲苯胺藍(lán)染色顯示四組都有不同程度的蛋白多糖減少和

3、纖維化，越向內(nèi)外側(cè)髁蛋白多糖減少越嚴(yán)重。OARS I評(píng)分結(jié)果顯示各組之間沒(méi)有差異（P＞0.05），但是我們的觀察發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M纖維化的深度和范圍都明顯大于野生型對(duì)照組。
　　3、免疫組化、免疫熒光和ELISA結(jié)果顯示，與野生型對(duì)照組相比，轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M腦組織及血漿中TNF-α、MMP-9及膝關(guān)節(jié)軟骨MMP-13表達(dá)量、腦組織星形膠質(zhì)細(xì)胞纖維膠質(zhì)酸性蛋白（GFAP）含量顯著增高（P＜0.05），而COL-II表達(dá)量低于野生型對(duì)照組

4、（P＜0.05）；與轉(zhuǎn)基因?qū)φ战M相比較，轉(zhuǎn)基因治療組的腦組織及血漿中TNF-α、MMP-9及膝關(guān)節(jié)軟骨MMP-13、腦組織GFAP數(shù)量明顯下降，而Col-Ⅱ蛋白含量顯著上升（P＜0.05）；而野生型治療組與野生型對(duì)照組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、APP/PS1轉(zhuǎn)基因鼠伴有膝關(guān)節(jié)軟骨損傷；
　　2、APP/PS1轉(zhuǎn)基因小鼠可能是通過(guò)促進(jìn)TNF-α、MMP-9和MMP-13等炎癥因子的分泌而誘發(fā)軟骨