瘤背石磺（Onchidium struma）繁殖、胚胎及幼體發(fā)育研究.pdf

1、瘤背石磺(Onchidium　struma)隸屬于軟體動物門(Mollusea)、腹足綱(Gastropoda)、肺螺亞綱(Pulmonata)、柄眼目(Stylommatophora)、石磺科(Onchidiidae)。通過野外采集不同體重石磺成體，解剖出性腺利用常規(guī)石蠟組織切片方法制片系統(tǒng)研究瘤背石磺的性腺發(fā)育規(guī)律及卵子與精子的發(fā)生過程；通過對產(chǎn)卵前后的瘤背石磺的生殖腺的組織切片方法進(jìn)一步明確瘤背石磺的獨特的生殖方式；利用活體和組織

2、切片相結(jié)合的方法，系統(tǒng)闡釋了瘤背石磺胚胎及幼體的發(fā)育規(guī)律，尤其是內(nèi)部器官的變化過程；同時在實驗室條件下初步篩選出適合瘤背石磺幼體生長和存活的餌料。 1、瘤背石磺性腺發(fā)育規(guī)律``利用組織學(xué)方法研究了瘤背石磺體重(2-28 g)與性腺發(fā)育、性腺指數(shù)與肝胰腺指數(shù)或粘液腺指數(shù)間的關(guān)系，不同體重瘤背石磺性腺內(nèi)各期生殖細(xì)胞的組成與比例以及瘤背石磺卵子和精子發(fā)生的規(guī)律。結(jié)果表明： (1)瘤背石磺的性腺指數(shù)有隨體重增加而增加的特點：10

3、 g以上個體性腺指數(shù)達(dá)到最高且基本無變化；不同體重瘤背石磺性腺指數(shù)與肝胰腺指數(shù)和粘液腺指數(shù)有明顯的正相關(guān)性(P<0.05)； (2)6 g以下組的瘤背石磺性腺濾泡管內(nèi)未發(fā)現(xiàn)有雌性生殖細(xì)胞，6 g以上組的性腺濾泡管內(nèi)雄性與雌性生殖細(xì)胞并存； (3)所有瘤背石磺個體性腺內(nèi)均有精子分布，6 g以下個體雄性生殖細(xì)胞組成以次級精母細(xì)胞為主，而6 g以上個體則以精子為主；6 g以上組的雌性生殖細(xì)胞成熟程度隨體重增加有明顯增加，其中6

4、-8 g以卵原細(xì)胞為主(57％)，8_10 g開始出現(xiàn)外源性卵黃合成期的卵母細(xì)胞，10-14 g時的外源性卵黃合成期的卵母細(xì)胞約為69％，且開始出現(xiàn)成熟卵母細(xì)胞。 (4)卵子發(fā)生共經(jīng)歷6期：分別為卵原細(xì)胞期、卵黃合成前卵母細(xì)胞期、內(nèi)源性卵黃合成期、外源性卵黃合成期、近成熟期和成熟卵母細(xì)胞期，成熟卵母細(xì)胞直徑約為(59.36±3.88)μm。精子發(fā)生經(jīng)歷精原細(xì)胞、初級精母細(xì)胞、次級精母細(xì)胞、精子細(xì)胞和精子共5個階段，精子長約(52

5、.44±20.65)μm。石磺體重與性腺發(fā)育程度密切相關(guān)，10 g以上的個體可做為親本使用。 2、瘤背石磺產(chǎn)卵前后生殖腺的組織學(xué)的變化對瘤背石磺納精囊、受精囊以及產(chǎn)卵前后兩性腺、蛋白腺以及粘液腺的進(jìn)行組織學(xué)觀察。同時發(fā)現(xiàn)并比較排出體外卵莢的活體及組織切片形態(tài)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)： (1)納精囊中儲存有大量成熟精子，其作用應(yīng)為當(dāng)瘤背石磺個體較小并產(chǎn)生精子時儲存精子，待卵子成熟后再與其受精。 (2)瘤背石磺產(chǎn)卵后兩性腺中部腺泡

6、排空，剩余少量處于小生長期的卵細(xì)胞。而位于兩性腺邊緣的腺泡則了充滿了處于大生長期的卵細(xì)胞，且腺泡形態(tài)飽滿致密。推測腺泡的發(fā)育應(yīng)為有邊緣向中央遷移，當(dāng)中央腺泡卵細(xì)胞被排除后，周圍的腺泡向中央推進(jìn)，其中卵細(xì)胞迅速生長成為成熟卵子，為下次排卵做準(zhǔn)備。 (3)瘤背石磺粘液腺中含有大量嗜堿性物質(zhì)，與排出體外的卵莢中的卵周液類似。粘液腺由嗜酸性和嗜堿性兩種區(qū)域組成，含有大量分泌細(xì)胞。 (4)推測瘤背石磺的生殖過程為：雄性生殖細(xì)胞成熟

7、后儲存在納精囊中。當(dāng)兩性腺中卵細(xì)胞成熟后，通過輸卵管排入受精囊，然后進(jìn)行交配行為。同時，大量的卵蛋白液進(jìn)入受精囊，包裹受精卵，經(jīng)過粘液腺的分泌的粘液再次包裹后形成卵莢并粘結(jié)成卵塊后發(fā)生產(chǎn)卵行為。 3、瘤背石磺胚胎和幼體發(fā)育在水溫27～29℃、氣溫27～31℃和海水鹽度為16的環(huán)境條件下人工孵化瘤背石磺的卵塊。對胚胎和幼體進(jìn)行活體顯微拍照和組織學(xué)研究。結(jié)果表明：根據(jù)早期發(fā)育的形態(tài)變化將其劃分為胚胎發(fā)育和幼蟲發(fā)育兩個階段。瘤背石磺的

8、胚胎發(fā)育具備典型的不等全裂、螺旋卵裂特征。組織切片可明顯觀察到卵周液的存在。瘤背石磺幼蟲為典型的腹足綱面盤幼蟲形態(tài)；活體可觀察到明顯的卵黃囊?？砂l(fā)現(xiàn)卵黃囊在孵化后的0-7天顯著縮小．組織切片可發(fā)現(xiàn)，瘤背石磺幼體消化道發(fā)育十分迅速，可觀察到明顯的食道、胃及消化腺。證明出膜的幼蟲已具有消化吸收的能力?？梢娏霰呈堑挠左w的早期發(fā)育是混合性營養(yǎng)。 4、不同餌料及配伍對瘤背石磺幼體的影響``利用六種餌料及配伍A微綠球藻(Nannochl

9、orisoculat)：B綠色巴夫藻(Pavlova viridis)；C球等鞭金藻(Isochrysis galbana)；D微綠球藻+綠色巴夫藻(N．orisoculata+P.viridis)：E綠色巴夫藻+球等鞭金藻(P.viridis+L galbana)；F微綠球藻+球等鞭金藻(N.orisoculata+I.galbana)；微綠球藻+球等鞭金藻的配伍對于石磺幼體的存活最具積極的作用。這兩種藻類DHA、EPA含量的互補為瘤