IL-6對(duì)杏仁核依賴性恐懼學(xué)習(xí)記憶的影響.pdf

1、前言：
　　白介素-6作為B細(xì)胞分化因子最早被發(fā)現(xiàn)的，具有多種生物學(xué)效應(yīng)，是一種代表性的細(xì)胞因子。它不僅參與免疫反應(yīng)，而且在神經(jīng)系統(tǒng)等許多生理系統(tǒng)中發(fā)揮著重要作用。IL-6及其受體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)廣泛存在。下丘腦、海馬、小腦、額葉皮質(zhì)、杏仁核是產(chǎn)生IL-6的主要場所。臨床研究表明在許多精神障礙患者中，IL-6水平上調(diào)。例如抑郁癥患者血清中IL-6水平比對(duì)照組明顯升高。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中也發(fā)現(xiàn)，在嚙齒動(dòng)物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)過高的IL-6水平會(huì)引

2、起抑郁癥狀。
　　然而，IL-6對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)學(xué)習(xí)記憶障礙的影響仍不清楚。一方面，之前的實(shí)驗(yàn)顯示，IL-6對(duì)記憶有不利影響，表現(xiàn)在隨著年齡的增長，IL-6水平升高，記憶功能缺失，如果破壞IL-6的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，記憶功能則得到改善。另一方面，通過靜脈注射或腹腔急性注射IL-6，卻不會(huì)對(duì)正常動(dòng)物的記憶產(chǎn)生任何影響。一些人類受試者實(shí)驗(yàn)也未能揭示出IL-6與記憶功能的相關(guān)關(guān)系。
　　為更加深入的了解IL-6對(duì)學(xué)習(xí)記憶功能的影響，我們

3、嘗試在大鼠杏仁核內(nèi)微量注射IL-6，觀察其對(duì)聽覺恐懼條件反射的影響?？謶謼l件反射，作為古典關(guān)聯(lián)學(xué)習(xí)實(shí)驗(yàn)，也稱為巴甫洛夫?qū)嶒?yàn)，被廣泛應(yīng)用于研究哺乳動(dòng)物學(xué)習(xí)記憶的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制，以探討人類恐懼認(rèn)知障礙的病理機(jī)制。當(dāng)一只大鼠在非條件刺激情況下，接受一個(gè)條件刺激，例如接受到一個(gè)聲音刺激，稱為聽覺恐懼條件反射，接受一個(gè)特殊的學(xué)習(xí)空間作為條件刺激，稱為空間恐懼條件反射。重復(fù)上述過程，當(dāng)條件刺激出現(xiàn)時(shí)，就會(huì)產(chǎn)生固有的恐懼行為反應(yīng)，比如僵立或自主反應(yīng)。

4、目前已經(jīng)證實(shí)，杏仁核對(duì)聽覺恐懼記憶的獲得、儲(chǔ)存及表達(dá)起著重要的作用。一些其他類型的恐懼條件反射，如空間恐懼條件反射及跟蹤恐懼條件反射還涉及到了海馬。最新研究報(bào)道海馬依賴的空間恐懼條件反射主要與IL-6炎癥相關(guān)。而IL-6對(duì)杏仁核依賴的恐懼條件反射的作用機(jī)制尚不清楚。
　　本實(shí)驗(yàn)通過經(jīng)典的聽覺恐懼條件反射，來觀察IL-6對(duì)杏仁核依賴的學(xué)習(xí)記憶功能影響的。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，大鼠杏仁核內(nèi)微量注射IL-6，使得聽覺恐懼條件反射無法正常建立。由于I

5、L-6通過信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)揮生理及病理學(xué)作用，所以我們進(jìn)一步針對(duì)JAK/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑研究了IL-6損傷恐懼條件反射的分子機(jī)制。
　　目的:
　　觀察杏仁核內(nèi)微量注射IL-6及JSI-124后的大鼠行為變化。研究IL-6的JAK/STAT信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑對(duì)杏仁核依賴性恐懼學(xué)習(xí)記憶的作用機(jī)制。
　　方法:
　　160只經(jīng)杏仁核埋管術(shù)后的Wistar大鼠隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組，處理組杏仁核內(nèi)微量注射IL-6，JSI-

6、124(JAK/STAT抑制劑)，對(duì)照組杏仁核內(nèi)微量注射人工腦脊液(ACSF)。通過恐懼條件反射實(shí)驗(yàn)檢測大鼠的行為指標(biāo)。行為學(xué)實(shí)驗(yàn)后取材、進(jìn)行免疫印跡分析，了解處理組與對(duì)照組的STAT及P-STAT定量變化結(jié)果。
　　結(jié)果：
　　1、聽覺恐懼條件反射實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　(1)給予20ng及40ng的IL-6后，處理組恐懼條件建立實(shí)驗(yàn)的僵立時(shí)間百分比低于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01);消退實(shí)驗(yàn)中處理組僵立時(shí)間百分比

7、較對(duì)照組顯著增加(p＜0.01)。
　　(2)給予JSI-124，JSI-124+IL-6及DMSO+IL-6后，JSI-124和JSI-124+IL-6組恐懼條件建立實(shí)驗(yàn)的僵立時(shí)間百分比高于DMSO+IL-6，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)。
　　2、各組大鼠杏仁核內(nèi)STAT及P-STAT免疫印跡分析定量變化
　　處理組杏仁核內(nèi)STAT激活百分比在1小時(shí)和4小時(shí)明顯高于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01)。