黃精對自然衰老大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞功能及端粒酶活性的影響.pdf

1、目的：
　　1.觀察黃精對自然衰老大鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞（endothelial progenitor cells，EPCs）功能及端粒酶活性的影響。
　　2.探討黃精干預(yù)EPCs衰老的可能作用機(jī)制。
　　方法：取健康SPF級SD大鼠60只，其中自然衰老大鼠（20月齡）48只，青年大鼠（5月齡）12只。青年大鼠設(shè)為對照組，衰老大鼠按體重隨機(jī)分為空白組，黃精高、中、低劑量組，每組12只；黃精高、中、低劑量組分別予以4g·kg

2、-1、2g·kg-1、1g·kg-1黃精水煎液灌胃，對照組和空白組予以等量生理鹽水灌胃，每日1次，連續(xù)12周后取動脈血檢測抗氧化力指標(biāo)，即血清總抗氧化力（total-antioxidant capacity，T-AOC）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽-過氧化物酶（glutathione-peroxidase，GSH-PX）及丙二醛（malondialdehyde，MDA）的含量。采用密度梯

3、度離心法結(jié)合差速貼壁法分離各組大鼠骨髓單個核細(xì)胞，用添加多種生長因子的全培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、特異性結(jié)合荊豆凝集素-1（ulex europaeus agglutinin，UEA-1）和乙酰化低密度脂蛋白（acetylated low density lipoprotein，ac-LDL）的攝取功能來對EPCs進(jìn)行鑒定。采用四唑鹽（MTT）法檢測各組細(xì)胞增殖力，遷移小室檢測遷移力，體外血管生成試劑盒檢測成小管功能，實時

4、熒光定量PCR（RT-PCR）法檢測端粒酶活性。
　　結(jié)果：
　　1.與對照組比較，空白組血清T-AOC、SOD、GSH-Px含量明顯減少，MDA含量增加(P<0.01)；與空白組比較，黃精高、中劑量組血清T-AOC、SOD、GSH-Px含量均有增加，MDA含量減少(P<0.05)，而黃精低劑量組血清各指標(biāo)無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。
　　2.剛分離的大鼠骨髓單個核細(xì)胞呈小圓形，誘導(dǎo)培養(yǎng)第4d可見細(xì)胞貼壁生長，以紡錘形細(xì)胞為主，

5、培養(yǎng)至第7d可見到明顯的細(xì)胞集落及線狀結(jié)構(gòu)的形成，傳代培養(yǎng)至第2-4周細(xì)胞呈典型的鋪路石樣，第4-8周出現(xiàn)生長高峰，呈放射狀生長；能吞噬ac-LDL并結(jié)合UEA-1。
　　3.與對照組比較，空白組骨髓EPCs功能受損明顯，端粒酶活性降低（P<0.01）；與空白組比較，黃精高、中劑量組均可促進(jìn)EPCs的增殖力、遷移力、成小管力和端粒酶活性（P<0.05），而低劑量組對EPCs功能和端粒酶活性無明顯影響。
　　結(jié)論：