姜黃素對(duì)急性高脂血癥大鼠血清ICAM-1、hS-CRP的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、目的:蛋黃乳劑法建立大鼠急性高脂血癥模型，明確姜黃素的降脂作用及對(duì)血清ICAM-1、hs-CRP的影響，進(jìn)一步探討姜黃素對(duì)炎癥誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷的保護(hù)機(jī)制。
　　方法:健康雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、高脂模型組、姜黃素低劑量組(姜黃素溶液125mg/kg.d)、姜黃素高劑量組(姜黃素溶液250mg/kg·d)、阿托伐他汀組(2.1mg/kg.d)5組。正常對(duì)照組和高脂模型組給予西王玉米油(5ml/kg·d)灌胃10

2、天，實(shí)驗(yàn)組分別給予相應(yīng)藥物灌胃干預(yù)10天。于第10天灌胃1小時(shí)后，分別給予高脂模型組、姜黃素高劑量組、姜黃素低劑量組、阿托伐他汀組大鼠一次性腹腔注射75％蛋黃乳液25ml/kg;給予正常對(duì)照組大鼠生理鹽水25ml/kg腹腔注射。于腹腔注射24小時(shí)（前14小時(shí)各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自由進(jìn)食水，取血前10小時(shí)禁食水），斷尾取血，靜置20分鐘，3000rpm/min離心15分鐘，取上清液，一部分用全自動(dòng)化學(xué)分析法測(cè)定TG、TC、HDL-C、LDL-C含

3、量，剩余部分用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(ELISA)檢測(cè)ICAM-1，hs-CRP含量。各組大鼠均于取血后給予4％水合氯醛(10ml/kg)腹腔注射麻醉大鼠，迅速打開(kāi)腹腔，取同一部位腹主動(dòng)脈，長(zhǎng)約2cm，-80℃液氮速凍，-23℃至-25℃下切片，供HE染色和免疫組織化學(xué)分析腹主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞胞核NF-κB p65的表達(dá)。應(yīng)用SPSS21.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料使用方差分析，用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示。組間比較采用方差分析，多

4、重比較采用LSD、SNK-q檢驗(yàn)。P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)果:
　　1、急性高脂血癥模型的建立對(duì)大鼠血清TC、TG、LDL的影響
　　蛋黃乳液腹腔注射6小時(shí)TG(9.66±10.98mmol/L)，TC(8.72±2.17mmol/L)，LDL-C(0.78±0.57mmol/L)開(kāi)始升高。至24小時(shí)TG(20.97±15.85mmol/L),TC(10.34±4.24mmol/L),LDL-C(0.

5、58±0.25mmol/L)達(dá)高峰，與腹腔注射蛋黃乳液前相比，高脂模型組大鼠血清TC、TG、LDL-C含量顯著升高(P＜0.01)，提示大鼠急性高脂血癥模型造模成功。（見(jiàn)Table1和Fig.1）
　　2、姜黃素對(duì)急性高脂血癥大鼠血清TC、TG、HDL、LDL的影響
　　與高脂模型組比較，姜黃素高劑量組、阿托伐他汀組TG、TC、LDL-C含量降低（P＜0.05），姜黃素低劑量組、阿托伐他汀組HDL-C含量顯著降低(P＜0.0

6、1)。
　　3、姜黃素對(duì)急性高脂血癥大鼠血清ICAM-1、hs-CRP的影響
　　與正常對(duì)照組比較，高脂模型組ICAM-1、hs-CRP含量顯著升高(P＜0.01)。與高脂模型組比較，姜黃素低劑量組、姜黃素高劑量組、阿托伐他汀組ICAM-1、hs-CRP含量顯著降低(P＜0.01);姜黃素低劑量組、姜黃素高劑量組、阿托伐他汀組各組間ICAM-1、hs-CRP兩兩比較，均未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05）。
　　4、姜黃素對(duì)

7、急性高脂血癥大鼠腹主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞胞核NF-κB p65表達(dá)的影響
　　NF-κB p65在血管主要表達(dá)于細(xì)胞核中，陽(yáng)性呈棕黃色，通過(guò)S-P法檢測(cè)腹主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞胞核NF-κB p65的表達(dá)。與正常對(duì)照組比較，高脂模型組NF-κB p65表達(dá)顯著升高(P＜0.01)。與高脂模型組比較，姜黃素低劑量組、姜黃素高劑量組、阿托伐他汀組NF-κB p65表達(dá)顯著降低（P＜0.01）。與姜黃素低劑量組比較，姜黃素高劑量組、阿托伐他汀組NF-κ

8、B p65表達(dá)顯著降低(P＜0.01）。姜黃素高劑量組與阿托伐他汀組比較，未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05）。
　　5、大鼠腹主動(dòng)脈病理形態(tài)學(xué)變化(HE染色)
　　正常對(duì)照組(見(jiàn)Fig.2)大鼠腹主動(dòng)脈HE染色鏡下可見(jiàn)血管壁結(jié)構(gòu)清晰，管腔規(guī)則，內(nèi)膜光滑連續(xù)，中膜層排列整齊，平滑肌細(xì)胞排列規(guī)則。高脂模型組(見(jiàn)Fig.3)大鼠腹主動(dòng)脈管腔明顯不規(guī)則，管壁厚薄不均，內(nèi)膜連續(xù)性破壞，內(nèi)皮細(xì)胞脫落，中膜層排列紊亂，彈性纖維結(jié)構(gòu)不清。姜黃素

9、低劑量組(見(jiàn)Fig.4)腹主動(dòng)脈管腔明顯不規(guī)則，管壁厚薄不均，內(nèi)膜連續(xù)性中斷，大部分破壞，平滑肌細(xì)胞排列紊亂。姜黃素高劑量組(見(jiàn)Fig.5)和阿托伐他汀組(見(jiàn)Fig.6)腹主動(dòng)脈管腔基本規(guī)則，管壁稍欠均勻，內(nèi)皮細(xì)胞間斷缺失，平滑肌細(xì)胞排列稍紊亂。
　　結(jié)論:
　　1、一次性腹腔注射75％蛋黃乳液成功制備大鼠急性高脂血癥模型，至24hTG、TC、LDL-C水平達(dá)高峰;hs-CRP、ICAM-1水平升高;NF-κB P65表達(dá)增