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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
研究TRPV1在高同型半胱氨酸促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞凋亡中的作用,闡明辣椒素抗動(dòng)脈粥樣硬化的可能機(jī)制。
方法:
以人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞為離體研究對(duì)象,不同濃度的同型半胱氨酸為干預(yù)措施(0mmol/L、0.05mmol/L、0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L、4mmol/L)及不同時(shí)間(6h、12h、24h、36h、48h)干預(yù)后用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖及活性
2、情況,選擇合適的同型半胱氨酸干預(yù)濃度及干預(yù)時(shí)間進(jìn)一步分組并給予辣椒素干預(yù),然后用細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)TRPV1蛋白是否在人血管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá);Western blotting檢測(cè)各組TRPV1蛋白的表達(dá)、TUNEL染色了解各組細(xì)胞凋亡情況。
結(jié)果:
①同型半胱氨酸對(duì)HUVECs的增殖能力有明顯的抑制作用,吸光值從(1.03±0.12)漸下降至(0.42±0.05),且呈明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系(P<0.01);當(dāng)干預(yù)濃度從0.
3、5mmol/L開始、干預(yù)24小時(shí)后對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞增殖具有抑制作用(P<0.05);
②細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)在HUVECs上有TRPV1蛋白表達(dá);
?、弁桶腚装彼岣深A(yù)后TPRV1在0.5mmol/L、1mmol/L、2mmol/L組表達(dá)較對(duì)照組下降(p<0.05)、細(xì)胞凋亡較對(duì)照組增加(P<0.05);
?、芾苯匪馗深A(yù)后,與單純同型半胱氨酸干預(yù)組比較,TRPV1蛋白表達(dá)升高(p<0.05)、細(xì)胞凋亡率下降,且有
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