Notch受體、配體在犬下頜骨非血管化輸送盤牽張成骨血管新生中的表達及意義.pdf

1、目的:研究Noch受體、配體在犬下頜骨非血管化輸送盤牽張成骨及骨缺損血管新生過程中的表達和意義，初步探討Notch信號通路在牽張成骨血管新生過程中的作用機制。
　　方法:將12只犬隨機分成非血管化輸送盤牽張成骨組（NTDO組）6只，對照組（骨缺損組）6只。非血管化輸送盤牽張成骨組于右側(cè)下頜骨下緣制作出長10.0mm×高10.0mm的頜骨缺損，在其遠中制備長15.0mm×高10.0mm游離輸送盤并在頰側(cè)安裝內(nèi)置式牽張器，5天后開始以

2、1.0mm/24h/次速度向近中連續(xù)牽張以修復缺損;對照組在相同的部位進行同樣的手術(shù)后直接使用鈦板鈦釘將輸送盤固定于近中，制作遠中10.0mm×高10.0mm的頜骨缺損。牽張完畢后固定1周，處死所有動物并收集標本，利用大體觀、X線、流式細胞儀、透射電鏡、HE染色、免疫組織化學技術(shù)、WesternBlot檢測。
　　結(jié)果:1）大體觀:所有實驗動物均完成牽張成骨的過程，傷口愈合良好，無感染和死亡，無牽張器、鈦板、鈦釘松動脫落等現(xiàn)象。下

3、頜骨牽張區(qū)域及輸送盤周圍為骨膜包繞。
　　2)X線片檢查:牽張間隙邊界清楚，中央可見透亮區(qū)，牽張區(qū)域和骨缺損區(qū)域未見骨阻射影，均為軟組織充填。
　　3)流式細胞儀檢測:NTDO組織中存在1.27％CD34、CD133抗原標記雙陽性細胞而對照組為0.65％，其余大部分CD34、CD133標記雙陰性細胞。
　　4)透射電鏡觀察:NTDO組多見由單個內(nèi)皮細胞構(gòu)成的未成熟毛細血管，對照組見由多個內(nèi)皮細胞構(gòu)成的較成熟毛細血管。<

4、br>　　5)HE染色:牽張區(qū)組織相較骨缺損區(qū)毛細血管多、細胞豐富。
　　6)免疫組化:CD105、Notch1、Notch2、Dll4、Jag2在NTDO組和對照組中均陽性表達;CD105、Notch1、Notch2、Dll4在NTDO組中表達水平顯著高于對照組(P＜0.05)，Jag2在兩者中表達水平無明顯差異(P＞0.05)。
　　7)WestemBlot: NTDO組中Notch1、Notch2、Dll4的表達高于對