犬下頜牽張成骨中與新骨快速形成相關(guān)lncRNA的初步研究.pdf

1、目的:
　　建立犬下頜骨牽張成骨、下頜骨骨折模型及幼犬下頜骨及胚胎下頜骨模型，通過高通量測(cè)序找到牽張成骨期間可能激活的與新骨快速形成相關(guān)的因子及信號(hào)通路。
　　方法:
　　實(shí)驗(yàn)共分為7組，其中實(shí)驗(yàn)組分別為牽張固定0周組(D01)、牽張固定2周組(D02)、犬30天胚胎組(E)、幼犬2周組(P)、骨折固定2周（對(duì)應(yīng)牽張組間歇期1周及牽張期1周）組(MF1)、骨折固定4周（對(duì)應(yīng)牽張組間歇期1周、牽張期1周及固定期2周）組(

2、MF2)及對(duì)照組(AC)。每小組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物為3只。D01和D02組中分別隨即選取3只健康成年中華田園犬，體重約15公斤，于其右側(cè)下頜骨施行下頜骨牽張成骨術(shù)。間歇期1周后開始以1mm/天速度將右下頜骨向近中方向牽張，牽張期1周共預(yù)計(jì)牽張7mm后牽張結(jié)束，處死D01組實(shí)驗(yàn)犬并收集右下頜骨牽張區(qū)標(biāo)本。D02組完成牽張后固定2周，固定期結(jié)束后拍攝錐形束CT觀察成骨情況，然后處死動(dòng)物并收集右側(cè)下頜骨牽張區(qū)新生標(biāo)本，記錄標(biāo)本大體觀。MF1和MF2組分

3、別隨即選取3只健康成年中華田園犬犬，體重約15公斤，于其右側(cè)下頜骨施行下頜骨骨折手術(shù)，術(shù)式參考下頜骨牽張成骨，骨折間隙為7mm。分別于2周及4周后拍攝CBCT及處死取材，收集右下頜骨骨折間隙標(biāo)本。E組為孕30天的母犬，拍攝B超確認(rèn)天數(shù)后納入實(shí)驗(yàn)組。P組為隨機(jī)選取3只同種出生2周健康幼犬納入實(shí)驗(yàn)組。AC組隨機(jī)選取3只健康成年中華田園犬，體重約15公斤。處死E組、P組及AC組并收集各組右下頜骨標(biāo)本。將7組標(biāo)本進(jìn)行高通量LncRNA測(cè)序檢測(cè)。

4、
　　結(jié)果:
　　1、D01、D02、MF1、MF2組動(dòng)物均順利完成手術(shù)及術(shù)后隨訪觀察。術(shù)后沒有實(shí)驗(yàn)犬出現(xiàn)相關(guān)嚴(yán)重并發(fā)癥，牽張器及鈦板固定牢固，未見松脫，亦未發(fā)現(xiàn)牽張器及鈦板的斷裂及變形。觀察所有實(shí)驗(yàn)犬行牽張前和牽張后右側(cè)尖牙牙位及骨折手術(shù)前后右側(cè)尖牙牙位，可發(fā)現(xiàn)牽張后及骨折后下頜尖牙相對(duì)于上頜尖牙有明顯的近中前移，說明右側(cè)頜骨成功通過牽張及人為骨折延長(zhǎng)。
　　2、從7組樣本中均提取出足量的總RNA，并分別成功構(gòu)建了用

5、于lncRNA測(cè)序所需的cDNA文庫(kù)。成功完成了各組高通量IncRNA測(cè)序。
　　3、本項(xiàng)目7組樣品數(shù)據(jù)，總共有3504個(gè)lincRNA和3731個(gè)novel lncRNA有表達(dá)。
　　4、牽張組、胚胎組、幼犬組同正常對(duì)照組及骨折組相比差異表達(dá)的lncRNA中，TCONS_00170590有可能調(diào)控其靶基因Lix1參與牽張成骨的快速成骨過程。
　　結(jié)論:
　　1、LncRNA TCONS_00170590在D01