兩株南極海洋來源真菌活性次級代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、南極海洋來源微生物生存環(huán)境特殊,其次級代謝產(chǎn)物結(jié)構(gòu)新穎、活性獨特,是新型藥物先導(dǎo)化合物的潛在來源。本論文采用了活性篩選和化學(xué)篩選相結(jié)合的方法,對南極來源具有抗腫瘤活性的微生物進行分離和篩選,選取其中2株具有抗腫瘤活性的真菌進行了活性次級代謝產(chǎn)物的研究。
　　 從采自南極海域的海綿、海藻、海水、海泥等11個樣品中分離得到了58株真菌。通過海蝦生物致死法初篩,獲得活性菌株8株。對這8株菌株,我們采用兩種培養(yǎng)基發(fā)酵,并采用人慢性髓原白

2、血病K562細胞通過SRB法篩選,得到5株具有較強細胞毒活性的菌株。對5株活性真菌進行發(fā)酵條件摸索,以其中2株(PRB-2、PR4-1-3)作為主要研究對象進行大量發(fā)酵,系統(tǒng)研究其活性次級代謝產(chǎn)物。
　　 對2株發(fā)酵產(chǎn)物的乙酸乙酯提取物采用薄層色譜、正相及反相硅膠柱色譜、LH-20凝膠柱色譜、高壓液相色譜等現(xiàn)代分離純化手段,從菌株P(guān)RB-2(Penicillium crustosum)的粗提物中分離得到15個單體化合物(1-15

3、);從菌株P(guān)R4-1-3(Penicillin chrysogenum)的粗提物中分離得到9個單體化合物(16-24);共24個化合物。
　　 利用現(xiàn)代波譜學(xué)(IR,UV,MS,NMR,X-ray)確定了全部24個化合物(1-24)的化學(xué)結(jié)構(gòu)(化合物結(jié)構(gòu)及名稱參見Table1),其中新化合物3個。新化合物結(jié)構(gòu)類型為γ-丁內(nèi)酯(1-3),其中1為新骨架化合物。已知化合物包括5個生物堿(4-7、18)、4個蒽醌(8、19-21),6

4、個苯的衍生物(9-11、22-24)、2個杉酮類化合物(16-17)和4個其他類化合物。
　　 通過SRB法初步評價了新化合物1-3的細胞毒活性,化合物1-3沒有表現(xiàn)出明顯的細胞毒活性。同時以MDCK細胞株為模型,采用CPE方法,對新化合物1-3和已知化合物16.17的抗H1N1流感病毒活性進行了初步評價,化合物2在50 ug/mL時,抑制率達到42.9％,具有弱效抗病毒活性;化合物16在50 ug/mL時,抑制率達到50％,具

5、有中效抗病毒活性。通過文獻查閱得知,化合物viridicatin(4),viridicatol(5),cyclopenine(6),cyclopenol(7);secalonic acid D(16),meleagrin(18),citreorosein(19)和emodin(21)都具有較強的細胞毒活性,分別為兩株菌發(fā)酵浸膏的主要活性成分,與浸膏活性篩選結(jié)果相符。
　　 綜上,本文從采自南極海洋的共11個樣品中分離篩選出5株具