兩株海洋來源真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究.pdf

1、海洋天然產(chǎn)物具有骨架結(jié)構(gòu)新穎，活性比例高的特點(diǎn)，海洋復(fù)雜的生態(tài)系統(tǒng)造就了海洋微生物的多樣性，以及代謝的特異性，海洋微生物次級(jí)代謝產(chǎn)物近年來成為天然產(chǎn)物研究的熱點(diǎn)。本論文對(duì)海洋來源的樣品進(jìn)行了菌株的分離純化以及抗腫瘤活性篩選，并采用了活性及化學(xué)追蹤的分離方法對(duì)其中2株真菌中的活性成分進(jìn)行了深入研究。主要研究內(nèi)容如下：海綿和珊瑚來源微生物的分離與抗腫瘤活性篩選；菌株發(fā)酵及次級(jí)代謝產(chǎn)物的提取分離；單體化合物的結(jié)構(gòu)鑒定和活性評(píng)價(jià)。
　　從

2、采集自西沙群島和廣西潿洲島海域的10個(gè)珊瑚和海綿樣品中共分離得到海綿珊瑚來源真菌30株。以P388腫瘤細(xì)胞系為活性篩選模型對(duì)30株真菌進(jìn)行細(xì)胞毒活性篩選，篩選結(jié)果顯示有6株真菌具有較好的細(xì)胞毒活性。結(jié)合HPLC和TLC信息挑選其中一株真菌作為目標(biāo)菌株Alternaria sp. TZP-11進(jìn)行發(fā)酵條件的摸索，并進(jìn)行了活性成分的深入探索。此外挑選實(shí)驗(yàn)室前期一株能生產(chǎn)新穎化合物的菌株P(guān)enicillium sp. F23-2，采用OSMA

3、C策略改變了其培養(yǎng)條件，對(duì)其發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行了重新研究。
　　對(duì)以上兩株真菌的發(fā)酵浸膏運(yùn)用多種色譜方法（TLC、MPLC、Sephadex LH-20、HPLC）進(jìn)行了分離，采用小鼠白血病腫瘤細(xì)胞株P(guān)388細(xì)胞為篩選模型結(jié)合TLC及HPLC，進(jìn)行活性及化學(xué)追蹤分離。從Alternaria sp. TZP-11的乙酸乙酯提取物中分離得到13個(gè)單體化合物，從Penicillium sp.F23-2的中分離得到10個(gè)單體化合物，共23個(gè)化合

4、物。
　　應(yīng)用 UV、MS、NMR、IR等波譜方法闡明了其中21個(gè)化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，其中新化合物3個(gè)（1、19、20）（化合物結(jié)構(gòu)參見Fig.1）。從真菌Alternaria sp. TZP-11中發(fā)現(xiàn)13個(gè)化合物，包括6個(gè)混源萜類化合物（1-6），2個(gè)聯(lián)苯類化合物（7、8），1個(gè)Trichothecenes萜類化合物（9），1個(gè)類甾體化合物（10），3個(gè)苯衍生物（11-13）。從深海海泥真菌F23-2中解析出8個(gè)化合物，包括4個(gè)

5、生物堿類化合物（14-17），1個(gè)萜類化合物（18），2個(gè)Ambuic Acid衍生物（19、20），1個(gè)甾類化合物（21）。對(duì)新化合物（1、19、20）及已知化合物（7-11）進(jìn)行了抗腫瘤活性的初步評(píng)價(jià)，結(jié)果顯示已知化合物（7、9、10）對(duì)小鼠白血病P388細(xì)胞具有一定的細(xì)胞增殖抑制活性，化合物（9、10）還對(duì)A-549細(xì)胞具有較好的增殖抑制活性。采用RLU法對(duì)上述9個(gè)化合物進(jìn)行了抗炎活性測試，其中（7、8、9）對(duì) RAW264.7細(xì)

6、胞具有良好的抑制活性，IC50分別為22.1μM，27.6μM和74.5 nM。
　　綜上所述，本文從采集至西沙群島和廣西潿洲島的珊瑚和海綿樣品中共分離到真菌30株，篩選出具有抗腫瘤活性菌株6株；從Alternaria sp. TZP-11以及Penicillium sp. F23-2的發(fā)酵產(chǎn)物中共分離得到23個(gè)單體化合物，解析了其中21個(gè)單體化合物的結(jié)構(gòu)，新化合物3個(gè)。化合物7有中等強(qiáng)度的抗腫瘤活性，化合物（9、10）具有較強(qiáng)的