雌激素對(duì)小鼠肝臟羧酸酯酶的作用及其機(jī)制.pdf

1、藥物進(jìn)入人體后會(huì)被當(dāng)作異物進(jìn)行清除。人體主要是肝臟通過藥物代謝酶對(duì)藥物進(jìn)行代謝。參與代謝的藥物代謝酶可以分為Ⅰ相藥物代謝酶和Ⅱ相藥物代謝酶。Ⅰ相藥物代謝酶包括細(xì)胞色素450(cytochrome P450)酶系、羧酸酯酶等。Ⅱ相藥物代謝酶包括硫轉(zhuǎn)移酶(sulfotransferase.SULT)、谷胱甘肽轉(zhuǎn)移酶(glutathione S-transferase, GST)等。
　　很多因素影響藥物代謝酶的表達(dá)和活性。這些因素包括

2、生理因素、環(huán)境因素、飲食、疾病與藥物等。生理因素包括性別、年齡、種族與個(gè)體差異。多種人體和動(dòng)物模型的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明性別是影響藥物代謝酶表達(dá)和活性的一個(gè)重要因素。
　　懷孕婦女和絕經(jīng)后的婦女體內(nèi)藥物代謝與正常非絕經(jīng)婦女及男性不同。孕婦或絕經(jīng)后婦女在使用某些藥物時(shí)，如果用相同劑量有可能會(huì)導(dǎo)致藥物對(duì)疾病的治療失敗或產(chǎn)生毒性反應(yīng)，這些主要是由于婦女在妊娠期、絕經(jīng)后體內(nèi)的雌激素水平發(fā)生改變。
　　雌激素是人體內(nèi)的一種重要的性激素。女性體

3、內(nèi)的雌激素主要由卵巢產(chǎn)生。在人體內(nèi)天然的雌激素包括雌酮、雌二醇、雌三醇。其中，雌二醇的生物活性最強(qiáng)。游離的雌激素分泌入血后擴(kuò)散到靶組織，與靶組織細(xì)胞上的核受體或膜性受體結(jié)合后激活信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路而發(fā)揮作用。雌激素主要通過四種途徑對(duì)下游靶基因發(fā)揮作用:1、經(jīng)典的配體依賴型轉(zhuǎn)導(dǎo)通路;2、非配體依賴型轉(zhuǎn)導(dǎo)通路;3、非ERE依賴型轉(zhuǎn)導(dǎo)通路;4、通過細(xì)胞膜轉(zhuǎn)導(dǎo)（非基因組）的信號(hào)通路。研究表明17β-雌二醇（17β-estradiol，E2）能夠改變某

4、些細(xì)胞色素450酶系的表達(dá)和活性。婦女妊娠期間，E2水平比正常婦女和男性的E2水平高100倍，婦女絕經(jīng)后血中的E2濃度減少80％-90％。E2有可能通過影響某些藥物代謝酶的表達(dá)來影響許多藥物的代謝。這些藥物代謝的變化進(jìn)而影響孕婦和絕經(jīng)后婦女用藥后的血藥濃度，進(jìn)而影響藥物療效或造成毒性反應(yīng)。
　　羧酸酯酶(Carboxylesterases，CES)屬于Ⅰ相藥物代謝酶，它存在于大多數(shù)哺乳動(dòng)物的肝、腸、腎等微粒體中。能夠水解羧酸酯類、

5、氨甲酸脂類、酰胺類、硫酯類物質(zhì)。羧酸酯酶包括兩型:羧酸酯酶1（Carboxylesterase1，人類為CES1，小鼠為Ces1d）、羧酸酯酶2（Carboxylesterase2，人類為CES2，小鼠為Ces1e），CES1(Ces1d)與CES2(Ces1e)結(jié)構(gòu)不同，主要水解的藥物也不同。CES1(Ces1d)能夠水解一些ACEI類抗高血壓藥物、氯吡格雷等。這些藥物作為前藥進(jìn)入人體需經(jīng)過CES1(Ces1d)的水解才能發(fā)揮作用。高

6、血壓和妊娠期高血壓是婦女絕經(jīng)后和妊娠期常見的一種疾病。高血壓是造成老年婦女心血管事件的主要因素、妊娠高血壓是孕產(chǎn)婦及圍生兒死亡的主要原因。CES2(Ces1e)主要代謝一些抗腫瘤藥物伊立替康等。E2對(duì)羧酸酯酶表達(dá)的影響對(duì)于女性絕經(jīng)后、妊娠期婦女合理用藥有重要的意義。
　　目的:在體和離體水平，研究雌激素對(duì)小鼠肝臟羧酸酯酶的作用及其機(jī)制。
　　方法:取三十只雌性ICR小鼠隨機(jī)分為三組，第一組為假手術(shù)組（SHAM），第二組為卵巢

7、切除組(OVX)，第三組為卵巢切除后給予雌激素組(OVX+E2)。處死后取肝臟組織，測量Ces1d、Ces1e的mRNA水平、蛋白質(zhì)水平及酶的水解活性的變化。離體培養(yǎng)小鼠肝原代細(xì)胞，給予不同濃度E2、在不同時(shí)間點(diǎn)測出Ces1d、Ces1e的表達(dá)及酶的水解活性的變化。再給予轉(zhuǎn)錄抑制劑ActD、AP-1通路抑制劑SP600125探討E2抑制Ces1d、Ces1e的機(jī)制。
　　結(jié)果:1、在體實(shí)驗(yàn)中，OVX組小鼠肝臟的Ces1d、Ces1

8、e的mRNA水平、蛋白質(zhì)水平和肝臟組織中酶的水解活性明顯增高。而OVX+E2組小鼠的肝臟Ces1d、Ces1e的mRNA、蛋白質(zhì)水平和肝臟組織中酶的水解活性較模型組(OVX)明顯降低，而接近正常對(duì)照組。提示E2對(duì)小鼠肝臟羧酸酯酶有抑制作用。2、在離體原代培養(yǎng)小鼠肝細(xì)胞中，E2能抑制Ces1d、Ces1e的表達(dá)及活性。3、給予轉(zhuǎn)錄抑制劑放線菌素D(Actinomycin D，ActD)后再給予E2后則能消除E2對(duì)Ces1d、Ces1e的m