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文檔簡介
1、由于興奮性和抑制性突觸對于神經(jīng)環(huán)路調節(jié)的重要性,谷氨酸能和GABA能突觸的功能研究一直是關注的熱點。以往的研究往往關注于兩者突觸后的差別,而突觸前的研究則大部分不區(qū)分二者或僅僅集中于谷氨酸能突觸。
我們的研究首先利用了高壓冷凍固定技術對小鼠大腦皮層組織的興奮性突觸和抑制性突觸囊泡結構形態(tài)進行了3D重構和大小與形態(tài)的比較,發(fā)現(xiàn)在抑制性的GABA能突觸中能夠觀察到較多直徑在60nm以上的囊泡,而興奮性突觸的囊泡則幾乎都集中在50n
2、m附近;接著,我們利用辣根過氧化物酶(HRP)對谷氨酸能突觸和GABA能突觸前的功能性回收囊泡進行標記,并在標記后的不同時間點進行固定和觀察,發(fā)現(xiàn)GABA能突觸的功能性回收囊泡中有大量直徑接近內(nèi)吞體(endosome)的大型囊泡,這些大型囊泡在回收后15min內(nèi)可以轉變生成小囊泡,而谷氨酸能突觸中這一現(xiàn)象并不明顯;之后,我們又利用FM4-64染料標記回收囊泡,并于15min后在熒光顯微鏡下對神經(jīng)元進行刺激和實時成像。我們發(fā)現(xiàn),GABA能
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