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文檔簡介
1、microRNA對動植物的正常發(fā)育有著非常重要的調(diào)節(jié)作用。然而，目前植物microRNA的功能研究主要是集中在擬南芥中。本實驗以粳稻日本晴為實驗材料，試圖通過過表達轉(zhuǎn)基因手段研究10個水稻microRNA的功能。這10個水稻microRNA的靶基因分別為F-box蛋白、GRF(Growth regulational factor)以及未知蛋白等等，預(yù)期功能分別為影響開花時間、調(diào)節(jié)莖的長短以及與信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和逆境脅迫相關(guān)等等。根據(jù)靶基因的功能
2、，對這10個microRNA進行探索性研究。取得的主要研究結(jié)果如下： 1.根據(jù)microRNA前體基因的結(jié)構(gòu)特點，設(shè)計引物，成功從水稻基因組利用PCR擴增出了Os-miR396等10個microRNA的前體基因，并將其構(gòu)建在UbiI水稻組成型啟動子之下。 2.以UbiI組成型啟動子驅(qū)動，將帶有目的基因的過表達載體通過凍融法轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，再經(jīng)農(nóng)桿菌介導(dǎo)來轉(zhuǎn)化水稻愈傷，通過潮霉素篩選得到抗性愈傷組織，經(jīng)分化再生獲得了OS-
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