神經(jīng)元活動(dòng)依賴的GluN2a-NMDA受體膜運(yùn)輸機(jī)制的研究.pdf

1、N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中一類重要的離子型谷氨酸能受體，在與學(xué)習(xí)記憶能力高度相關(guān)的中樞神經(jīng)信號(hào)傳遞長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)(LTP)的形成中起著重要作用。有研究表明在海馬神經(jīng)元中由NMDA受體介導(dǎo)的LTP過(guò)程中膜表面表達(dá)的NMDA受體數(shù)目有所上升，但對(duì)其亞基GluN2膜表面數(shù)目的變化情況及快速上膜的亞基的具體來(lái)源都不清楚。
　　目的:研究活動(dòng)性依賴的GluN2亞基的快速上膜情況及其來(lái)源以便深入地地理解學(xué)習(xí)和記憶形成的

2、機(jī)制。
　　方法及結(jié)果:在本篇論文中，我們利用了化學(xué)誘導(dǎo)和高鉀去極化刺激兩種LTP誘導(dǎo)模型，重點(diǎn)研究了在培養(yǎng)的大鼠皮層和海馬神經(jīng)元中NMDA受體GluN2A亞基在兩種模型刺激后的膜表面表達(dá)及運(yùn)輸情況。利用生物素標(biāo)記技術(shù)、提取突觸后致密區(qū)蛋白組分和蛋白印記技術(shù)研究發(fā)現(xiàn)兩種刺激模型下GluN2A亞基的表面表達(dá)均出現(xiàn)了上升;用普通的綠色熒光蛋白或PH敏感型的綠色熒光蛋白標(biāo)記GluN2A亞基，利用免疫細(xì)胞化學(xué)和活細(xì)胞顯微技術(shù)觀察得到的結(jié)果

3、與上述結(jié)論一致。分別采用微管解聚劑Nocodazole和肌動(dòng)蛋白抑制劑Cytochalasin D處理神經(jīng)元發(fā)現(xiàn)，Cytochalasin D可以抑制GluN2A上升趨勢(shì)，但Nocodazole對(duì)GluN2A的上膜情況并沒(méi)有影響;長(zhǎng)時(shí)間（大于0.5h）使用翻譯抑制劑cycloheximide可阻斷GluN2A的上膜，但短時(shí)間使用cycloheximide不能阻斷GluN2A亞基的快速上升。同時(shí)，我們觀察到在兩種刺激模型下GluN2A亞基