揚(yáng)子鱷輸卵管蛋白分泌物及性激素受體定位兼論B超對(duì)卵泡發(fā)育的檢測(cè).pdf

1、揚(yáng)子鱷是國(guó)家一級(jí)重點(diǎn)保護(hù)的珍稀爬行動(dòng)物，已被IUCN確認(rèn)為世界上最瀕危的鱷類之一。無(wú)論對(duì)于揚(yáng)子鱷的野生種群還是圈養(yǎng)種群而言，積極開展相關(guān)的繁殖生物學(xué)研究都具有著極其重要的意義。輸卵管、性激素以及卵巢發(fā)育均在雌性爬行動(dòng)物的生殖過(guò)程中扮演著重要的角色。但當(dāng)前針對(duì)揚(yáng)子鱷輸卵管蛋白分泌及其性激素受體定位的研究尚處于空白。
　　本研究以雌性揚(yáng)子鱷的輸卵管為研究對(duì)象，利用組織化學(xué)、免疫化學(xué)、超微結(jié)構(gòu)技術(shù)，研究了揚(yáng)子鱷輸卵管的蛋白分泌情況以及性

2、激素受體的分布等，研究成果為揚(yáng)子鱷輸卵管內(nèi)環(huán)境的變化及其與性激素受體作用關(guān)系等研究提供了參考。研究表明：揚(yáng)子鱷輸卵管劃分為漏斗部、蛋白分泌部、峽部、子宮部、陰道部5個(gè)分區(qū)，通過(guò)組織化學(xué)方法，運(yùn)用schiff試劑（PAS），阿利新藍(lán)（AB），汞–溴酚藍(lán)（BB）三種不同的染色劑分別對(duì)各個(gè)區(qū)域中性黏蛋白，酸性黏蛋白和蛋白質(zhì)分布進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，并在透射電鏡下觀察各部分細(xì)胞的分泌情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)輸卵管分泌部，子宮部，陰道部上皮細(xì)胞的三種陽(yáng)性物質(zhì)在各時(shí)期分

3、布較多，分泌部和子宮部全年以中性和酸性粘蛋白為主，陰道部上皮三種陽(yáng)性染色均較多。分泌部腺體PAS，BB陽(yáng)性物質(zhì)分泌較多，子宮部腺體以AB，BB陽(yáng)性為主，陰道部腺體各種物質(zhì)分泌相對(duì)較少。電鏡下上皮細(xì)胞由纖毛細(xì)胞及分泌細(xì)胞排列而成。分泌部，子宮部，陰道部分泌泡的電子密度排卵前大于產(chǎn)蛋后。這些數(shù)據(jù)都支持揚(yáng)子鱷輸卵管不同的部位分泌的不同蛋白可能用于形成卵清蛋白，蛋殼纖維和鈣化外殼等。免疫化學(xué)染色定位不同時(shí)期輸卵管雌激素受體（ER）、雄激素受體（

4、AR）、孕激素受體（PR）的分布情況，結(jié)果表明，三種性激素受體在整條輸卵管都有分布，三種受體總體分布1月份較多，5月份最少，到7月再次增加到峰值，8月維持較高水平。對(duì)17條分別處于冬眠期及活動(dòng)期的成年雌性揚(yáng)子鱷的卵泡發(fā)育進(jìn)行了B型超聲波檢測(cè)，并對(duì)冬眠期的卵巢卵泡發(fā)育情況進(jìn)行了回歸分析。結(jié)果表明揚(yáng)子鱷心、肝、腸等內(nèi)臟器官形態(tài)在B超視野下清晰可見。冬眠期兩側(cè)卵巢中的卵泡共41枚，繁殖期共42枚。冬眠期卵泡處于低回聲暗區(qū)或無(wú)回聲暗區(qū)的未成熟狀