經(jīng)筋微創(chuàng)療法治療膝骨性關(guān)節(jié)炎臨床療效及對(duì)TLR4信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響.pdf

1、目的:
　　1.以藥物、藥物加電針為對(duì)照，觀察經(jīng)筋微創(chuàng)松解療法治療人膝骨性關(guān)節(jié)炎的臨床療效。
　　2.通過(guò)對(duì)木瓜蛋白酶誘導(dǎo)的兔膝骨性關(guān)節(jié)炎TLR4/MyD88/NF-κ B信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的實(shí)驗(yàn)研究，闡明經(jīng)筋微創(chuàng)松解技術(shù)治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的作用機(jī)制。
　　方法:
　　1.臨床研究:在廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院中醫(yī)科門(mén)診、住院病房的患者，由廣州軍區(qū)廣州總醫(yī)院確診膝骨性關(guān)節(jié)炎的，根據(jù)診斷、納入、排除標(biāo)準(zhǔn)，選擇患者60例。將研究對(duì)象

2、隨機(jī)分成三組，分別為藥物組、藥物加電針組、藥物加經(jīng)筋微創(chuàng)松解組。觀察三組研究對(duì)象治療前及治療1個(gè)月后臨床及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，并根據(jù)VAS評(píng)分、WOMAC評(píng)分量表評(píng)價(jià)臨床療效。最后將三組所得的各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行組間對(duì)照，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，得出結(jié)論。
　　2.實(shí)驗(yàn)研究:選取24只清潔級(jí)健康6月齡新西蘭兔，體重2kg±0.5kg，雌雄各半，取6只為空白組，其余18只統(tǒng)一采用1.6％木瓜蛋白酶于實(shí)驗(yàn)第1、4、7天左膝關(guān)節(jié)腔注射造模，空白組予以等

3、劑量0.9％生理鹽水膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射;在造模6周后，將18只新西蘭兔隨機(jī)分為三組，分別為經(jīng)筋微創(chuàng)組、電針組、造模組，每組各6只。單籠飼養(yǎng)，籠大小可保證其自由活動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室溫度恒定，23℃-25℃，濕度60％，紫外線定期消毒，自由飲食攝水。在造模過(guò)程中，如出現(xiàn)足底潰爛、足底咬傷、骨折、皮膚感染、腹瀉等情況，均予以剔除。造模結(jié)束1周后，四組兔各隨機(jī)抽取1只予X線正側(cè)位攝片，與空白組相比，其余各組均可見(jiàn)明顯關(guān)節(jié)間隙狹窄、骨贅形成、軟骨下骨硬化、軟

4、骨下囊變，提示造模成功。按照組別開(kāi)始進(jìn)行電針、經(jīng)筋微創(chuàng)治療干預(yù)，共治療4周。其中，電針治療隔天1次，每周3次;經(jīng)筋松解組行針刀鏡治療1次后1周行經(jīng)筋刀治療，經(jīng)筋刀1次/周，持續(xù)3周。各組兔于治療結(jié)束后1周用空氣栓塞法處死。大體觀察各組左膝關(guān)節(jié)軟骨和滑膜等的病理表現(xiàn)，光鏡觀察各組兔左膝關(guān)節(jié)軟骨切片病理表現(xiàn)，熒光定量PCR和Western Blot分別檢測(cè)TLR4、MyD88、NF-κB基因和蛋白表達(dá)。最后用統(tǒng)計(jì)學(xué)處理進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。

5、　　結(jié)果:
　　1.臨床研究:根據(jù)VAS評(píng)分、WOMAC量表評(píng)分做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，藥物組、藥物加電針組、藥物加經(jīng)筋微創(chuàng)組在治療4周后與治療前相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);組間比較，藥物加經(jīng)筋微創(chuàng)組優(yōu)于藥物組及藥物加電針組(P＜0.05)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.動(dòng)物實(shí)驗(yàn):造模成功后予干預(yù)治療4周，干預(yù)治療結(jié)束后，①大體觀察各組兔關(guān)節(jié)軟骨和滑膜表現(xiàn):空白組滑膜呈淡紅色，無(wú)充血、水腫，關(guān)節(jié)面光滑、無(wú)贅生物，軟骨色澤較透亮

6、，關(guān)節(jié)液清亮、無(wú)渾濁，關(guān)節(jié)囊無(wú)增厚;造模組左膝關(guān)節(jié)明顯腫脹，打開(kāi)后滑膜增厚、有充血，關(guān)節(jié)軟骨顏色暗淡、無(wú)光澤，骨面凹凸不平較毛糙，可見(jiàn)數(shù)個(gè)骨贅形成，關(guān)節(jié)液顏色淡黃渾濁、質(zhì)粘稠，關(guān)節(jié)囊明顯增厚;電針組左膝關(guān)節(jié)輕度腫脹，打開(kāi)后滑膜輕度增厚伴少許充血，軟骨色澤淡白，骨面輕度缺損，少許骨贅，關(guān)節(jié)液較清亮，關(guān)節(jié)囊輕度增厚;經(jīng)筋微創(chuàng)組左膝關(guān)節(jié)輕度腫脹，滑膜增生較空白組重、較電針組輕，無(wú)明顯充血，軟骨色澤淡白、骨面輕度缺損，可見(jiàn)少許骨贅，關(guān)節(jié)液量較空

7、白組多，質(zhì)清，關(guān)節(jié)囊輕度增厚。②光鏡觀察各組兔軟骨HE染色病理切片結(jié)果:經(jīng)筋微創(chuàng)組膝關(guān)節(jié)軟骨表面輕度破壞，四層結(jié)構(gòu)基本正常，軟骨細(xì)胞排列大致正常，可見(jiàn)少許新生軟骨細(xì)胞，潮線較清晰，無(wú)細(xì)胞簇集及血管翳;電針組膝關(guān)節(jié)軟骨表面欠光滑，表層輕度破壞，四層結(jié)構(gòu)不清晰，軟骨細(xì)胞排列較亂，部分軟骨有簇集，潮線模糊，未見(jiàn)血管翳;造模組膝關(guān)節(jié)軟骨表面粗糙，軟骨層厚薄不均，四層結(jié)構(gòu)分辨不清，部分軟骨層有裂隙、剝脫，軟骨細(xì)胞排列雜亂，部分軟骨細(xì)胞簇集，潮線扭

8、曲，部分可見(jiàn)血管翳;空白組膝關(guān)節(jié)軟骨表面光滑，厚度正常，四層結(jié)構(gòu)分辨清晰，軟骨細(xì)胞排列有序，切層軟骨細(xì)胞呈梭形分布于軟骨表淺層，未見(jiàn)軟骨細(xì)胞簇集現(xiàn)象，潮線清晰，未見(jiàn)血管翳。③熒光定量PCR和Western Blot分別檢測(cè)各組軟骨TLR4、MyD88、NF-κB基因和蛋白表達(dá)變化:經(jīng)筋微創(chuàng)組、電針組、造模組TLR4、MyD88、NF-κB基因和蛋白表達(dá)較空白組明顯上調(diào)，經(jīng)筋微創(chuàng)組較電針組及造模組相比TLR4、MyD88、NF-κB基因和

9、蛋白表達(dá)有所下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.臨床研究:通過(guò)觀察、對(duì)比藥物聯(lián)合經(jīng)筋微創(chuàng)療法、藥物聯(lián)合電針及單純運(yùn)用藥物治療膝骨性關(guān)節(jié)炎的療效可知，三種治療方法均能緩解關(guān)節(jié)疼痛、腫脹等，改善關(guān)節(jié)功能活動(dòng)障礙。而經(jīng)筋微創(chuàng)療法相較電針及單純藥物治療，緩解病情速度更迅速、整體療效顯著，值得臨床推廣。
　　2.實(shí)驗(yàn)研究:通過(guò)大體觀察關(guān)節(jié)軟骨和滑膜等表現(xiàn)、光鏡下觀察軟骨HE染色病理切片、熒光定量PCR和