標本配穴電針干預(yù)對慢性心肌缺血模型大鼠心肌線粒體結(jié)構(gòu)功能影響研究.pdf

1、目的：
　　心肌缺血是引發(fā)心血管疾病的主要原因。針灸療法具有無毒副作用、操作方便及價格低廉等優(yōu)勢，對心臟生理活動有良好的調(diào)整作用，可以有效地預(yù)防、治療心肌缺血。本實驗采用“標本配穴”電針方法對大鼠進行干預(yù)，以心肌能量改變?yōu)榍腥朦c，觀察心肌細胞三步有氧呼吸的相關(guān)酶GADPH、CS、CCO活性，線粒體的結(jié)構(gòu)與功能，心肌微觀組織結(jié)構(gòu)，大鼠心電圖S-T段及形態(tài)與行為學(xué)變化，從局部至整體分析“標本配穴”腧穴配伍方法對大鼠心肌缺血的保護效應(yīng)，

2、探討“標本配穴”電針干預(yù)對慢性心肌缺血的預(yù)防及治療效果。
　　方法：
　　本實驗選用3月齡Wistar雄性大鼠45只，體重180~220g，編號后按隨機數(shù)字表分入空白組、模型組、標本配穴電針干預(yù)組，每組15只。三組大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3日后，于第4日起正常組大鼠連續(xù)7天在頸背部皮膚豐厚處按照5mg/kg行皮下注射0.9％無菌生理鹽水；模型組大鼠連續(xù)7天在頸背部皮膚豐厚處按照5mg/kg行皮下注射鹽酸異丙腎上腺素建造慢性心肌缺血模型

3、；干預(yù)組大鼠連續(xù)7天給予足三里、關(guān)元、內(nèi)關(guān)電針干預(yù)，同側(cè)足三里與內(nèi)關(guān)組成一對接通電極，關(guān)元旁5mm處另直刺一針，與關(guān)元組成一組接通電極，采用韓式-200型號電針治療儀，選用疏密波，2~100Hz，1mA，每天干預(yù)10分鐘。電針干預(yù)后在頸背部皮膚豐厚處按照5mg/kg行皮下注射鹽酸異丙腎上腺素建造慢性心肌缺血模型，造模后繼續(xù)給予電針干預(yù)14天。分別于第3天、第10天、第17天、第24天記錄三組大鼠心電圖S-T段振幅與一般情況，于第25天取

4、材，觀察心肌組織結(jié)構(gòu)及線粒體超微結(jié)構(gòu)，檢測線粒體呼吸控制率、心肌組織3-磷酸甘油醛脫氫酶、檸檬酸合成酶、細胞色素C氧化酶活性及組織內(nèi)ATP含量。
　　結(jié)果：
　　1.大鼠一般情況觀察比較：在實驗過程中，模型組大鼠眼角附著分泌物，口唇紫紺或淡，鼠尾色淡，鼠毛稀黃，精神萎靡，反應(yīng)能力減弱、飲食量減少；干預(yù)組大鼠僅表現(xiàn)為眼迷、易驚，其余如常。
　　2.心電圖S-T段振幅比較：模型組與干預(yù)組大鼠在造模后心電圖S-T段明顯升高，

5、與正常組相比較存在顯著性差異（P<0.01）；電針干預(yù)后，干預(yù)組大鼠S-T段趨于正常，與模型組相比較存在顯著性差異（P<0.01）。
　　3.大鼠心肌組織病理結(jié)構(gòu)的比較：光學(xué)顯微鏡下模型組大鼠心肌纖維排列紊亂，部分纖維結(jié)構(gòu)破壞，細胞核固縮，心肌間質(zhì)水腫、出血，炎癥細胞浸潤間隙增大。干預(yù)組大鼠組織結(jié)構(gòu)大致正常，少量心肌纖水腫、結(jié)構(gòu)模糊，心肌間質(zhì)存在少量紅細胞，輕度水腫。透射電鏡下模型組大鼠心肌細胞肌原纖維斷裂、結(jié)構(gòu)模糊，排列紊亂，閏

6、盤融合、形變，心肌細胞腫脹、空化、破壞，細胞核破壞，線粒體排列紊亂，部分線粒體固縮、腫脹、空泡樣病變，線粒體嵴斷裂成絮狀或缺失。干預(yù)組大鼠部分肌絲溶解、斷裂，心肌細胞輕微腫脹，輕度空化，線粒體排列稍紊亂，部分線粒體水腫、存在空泡樣病變。
　　4.大鼠心肌組織ATP含量的比較：模型組的大鼠心肌組織ATP含量明顯低于空白組，存在顯著性差異（P<0.01）；干預(yù)組的大鼠心肌組織ATP含量明顯高于模型組，存在顯著性差異（P<0.01），但

7、干預(yù)組心肌組織ATP含量低于空白組，差異顯著（P<0.01）。
　　5.大鼠心肌線粒體RCR的比較：模型組的大鼠線粒體RCR明顯降低處于異常水平，與空白組線粒體RCR存在顯著性差異（P<0.01）；干預(yù)組的大鼠線粒體RCR處于正常水平，明顯高于模型組，存在顯著性差異（P<0.01），但干預(yù)組線粒體 RCR低于空白組，差異顯著（P<0.01）。
　　6.大鼠心肌組織GAPDH活性比較：模型組的大鼠心肌組織GAPDH活性明顯低于

8、空白組，存在顯著性差異（P<0.01）；干預(yù)組的大鼠心肌組織GAPDH活性明顯高于模型組，存在顯著性差異（P<0.01），但干預(yù)組心肌組織GAPDH活性低于空白組，差異顯著（P<0.01）。
　　7.大鼠心肌組織CS活性比較：模型組的大鼠心肌組織CS活性明顯低于空白組，存在顯著性差異（P<0.01）；干預(yù)組的大鼠心肌組織CS活性明顯高于模型組，存在顯著性差異（P<0.01），但干預(yù)組心肌組織CS活性低于空白組，差異顯著（P<0.0

9、1）。
　　8.大鼠心肌線粒體CCO活性比較：模型組的大鼠心肌線粒體CCO活性明顯低于空白組，存在顯著性差異（P<0.01）；干預(yù)組的大鼠心肌線粒體CCO活性明顯高于模型組，存在顯著性差異（P<0.01），但干預(yù)組心肌線粒體CCO活性低于空白組，差異顯著（P<0.01）。
　　9.心肌線粒體 RCR、心肌組織 GAPDH、CS、CCO活性與心肌組織ATP含量相關(guān)分析：大鼠心肌組織ATP與心肌線粒體RCR、心肌組織GAPDH、

10、CS、CCO活性之間存在線性相關(guān)，具有統(tǒng)計學(xué)意義，R2分別為0.886、0.942、0.908及0.949。
　　結(jié)論：
　　1.使用連續(xù)注射ISO的方法可以成功誘建大鼠慢性心肌缺血模型，且操作簡便、可控、成功率高。
　　2.“標本配穴”電針干預(yù)能夠改善實驗大鼠心臟的心電活動及心肌組織形態(tài)學(xué)表達，防止心肌組織結(jié)構(gòu)的破壞，修護心肌缺血性損傷，更對線粒體的結(jié)構(gòu)與功能起到了良性的調(diào)節(jié)作用。
　　3.“標本配穴”電針干預(yù)