肝細(xì)胞性肝癌組織樣本中CD133+細(xì)胞腫瘤干細(xì)胞樣特性的研究.pdf

1、背景與目的：肝細(xì)胞性肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是原發(fā)性肝癌中最常見(jiàn)的病理類型，其發(fā)病率有日益增長(zhǎng)的趨勢(shì)。腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cells,CSCs)學(xué)說(shuō)認(rèn)為，在腫瘤組織中存在一小群具有干細(xì)胞特性的腫瘤細(xì)胞，稱為CSCs，它與腫瘤的增殖、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和對(duì)放化療不敏感密切相關(guān)。而越來(lái)越多的研究結(jié)果表明,在腫瘤中能檢測(cè)到CSCs的存在。本研究從HCC組織樣本中分離CD133+細(xì)胞，并對(duì)其是否具

2、有CSCs樣特性進(jìn)行研究。
　　方法：將25例手術(shù)獲得的新鮮HCC組織和對(duì)應(yīng)癌旁肝組織采用酶消化法分別消化成單個(gè)肝癌細(xì)胞和單個(gè)肝細(xì)胞，利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)部分單個(gè)肝癌細(xì)胞和單個(gè)肝細(xì)胞CD133的表達(dá)率。另外，用剩余的肝癌細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng)，用流式細(xì)胞術(shù)將培養(yǎng)獲得的肝癌細(xì)胞分選為CD133+和CD133-細(xì)胞，然后通過(guò)平板克隆形成實(shí)驗(yàn)、腫瘤球形成實(shí)驗(yàn)和裸鼠移植瘤形成實(shí)驗(yàn)對(duì)比分析這兩組細(xì)胞的CSCs樣特性。
　　結(jié)果：通過(guò)酶消化法，

3、我們成功地培養(yǎng)出可傳代的肝癌細(xì)胞。25例HCC組織中CD133的表達(dá)率為3.8％～8.3%，平均值為（5.8±1.6）%，而癌旁肝組織CD133的表達(dá)率為0.1%～0.4%，平均值為（0.2±0.1）%，兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=17.12，P<0.001）。分選獲得的CD133+和CD133-細(xì)胞的平均克隆率分別為（25.2±0.8）%和（7.6±0.8）%，兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=81.95，P<0.001）。分選獲得的C

4、D133+和CD133-細(xì)胞的平均成球率分別為（20.3±0.6）%和（12.5±1.4）%，兩者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=68.17，P<0.001）。取5例高表達(dá)CD133者進(jìn)行裸鼠移植瘤形成實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明CD133+細(xì)胞的裸鼠移植瘤形成能力明顯高于CD133-細(xì)胞。
　　結(jié)論：1、從HCC組織樣本中分離獲得的CD133+細(xì)胞只占HCC組織的一小部分。
　　2、從HCC組織樣本中分離獲得的CD133+細(xì)胞具有明顯的CSC