慢性牙周炎不同臨床階段齦溝液及血清中Th17和Treg的相關(guān)細(xì)胞因子的檢測(cè).pdf

1、目的：牙周炎是發(fā)生在牙周組織的慢性感染性疾病。牙周致病菌和宿主免疫反應(yīng)共同作用影響牙周炎的發(fā)展。輔助性T細(xì)胞17（Th17）和調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）及相關(guān)細(xì)胞因子在牙周炎發(fā)病過(guò)程中發(fā)揮重要作用。本實(shí)驗(yàn)以慢性牙周炎患者為研究對(duì)象，用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）檢測(cè)齦溝液及血清中白細(xì)胞介素17（IL-17）、白細(xì)胞介素23（IL-23）、白細(xì)胞介素10（IL-10）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β（TGF-β）的水平。分析IL-17、IL-23、IL-

2、10、TGF-β之間及其與牙周炎各項(xiàng)臨床指標(biāo)間的關(guān)系，探討Th17細(xì)胞和Treg細(xì)胞在慢性牙周炎發(fā)病機(jī)制方面所起的作用。為慢性牙周炎的發(fā)生發(fā)展過(guò)程提供免疫學(xué)的依據(jù)，進(jìn)而從免疫學(xué)角度闡述慢性牙周炎發(fā)病機(jī)制并為其治療提供理論依據(jù)。
　　方法：選擇河北省口腔醫(yī)院口腔內(nèi)科門(mén)診患者。根據(jù)口腔情況分為4組：正常對(duì)照組（A組）10例，牙齦炎組（B組）10例，慢性牙周炎輕度組（C組）9例，慢性牙周炎中重組（D組）11例，檢查全口余留牙齒并詳細(xì)記錄

3、每顆牙的牙周情況及除第三磨牙外的所有缺牙數(shù)。牙周檢查包括：菌斑指數(shù)（PLI）、出血指數(shù)（BI）、探診深度（PD）、附著喪失（AL）等，同時(shí)拍攝常規(guī)X線曲面斷層片輔助診斷。所有受試者均選取六顆指數(shù)牙（16、11、26、36、31、46），取6顆指數(shù)牙的近中頰位點(diǎn)的牙周指標(biāo)的均值來(lái)代表該患者的牙周情況，從而保證實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的科學(xué)性。用吸潮紙尖收集所有受試牙的近中頰位點(diǎn)的齦溝液并混合，采用ELISA法檢測(cè)齦溝液中IL-17、IL-23、IL-10

4、、TGF-β的濃度，并與各臨床指標(biāo)作相關(guān)性檢驗(yàn)。清晨空腹采集受試者外周靜脈血6 mL，2 mL肝素抗凝血用于檢測(cè)白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)（中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞）。剩余4 mL離心取上清，采用ELISA法檢測(cè)血清中IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β的濃度，并與各臨床指標(biāo)作相關(guān)性檢驗(yàn)。
　　結(jié)果：⑴齦溝液的量的變化。B組、C組、D組齦溝液的量均顯著高于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C組、D組齦溝液的

5、量均顯著高于B組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；D組齦溝液的量顯著高于C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。齦溝液的量與 PD、AL呈正相關(guān)關(guān)系（ r=0.889, P<0.01; r=0.843, P<0.01）。⑵四種細(xì)胞因子的濃度變化：B組、C組、D組齦溝液及血清中IL-17濃度均顯著高于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C組、D組齦溝液及血清中IL-17濃度均顯著高于B組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；D組齦溝液及血清中IL-1

6、7濃度均顯著高于C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在齦溝液中，IL-17濃度與PD、AL呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.726, P<0.01；r=0.796, P<0.01）；在血清中，IL-17濃度與PD、AL呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.856, P<0.01;r=0.818, P<0.01）；B組、C組、D組齦溝液及血清中IL-23濃度均顯著高于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C組、D組齦溝液及血清中IL-23濃度均顯著高于B組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意

7、義（P<0.05）；D組齦溝液及血清中IL-23濃度均顯著高于C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在齦溝液中，IL-23濃度與PD、AL呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.830, P<0.01;r=0.863, P<0.01）；在血清中，IL-23濃度與PD、AL呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.855, P<0.01;r=0.859, P<0.01）。⑶IL-17與IL-23相關(guān)性。在齦溝液及血清中，IL-17濃度與IL-23濃度均呈正相關(guān)關(guān)系（r=0.77

8、7, P<0.01;r=0.743, P<0.01）。⑷B組、C組齦溝液中IL-10濃度均顯著高于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；C組齦溝液中IL-10濃度顯著高于B組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；D組齦溝液中IL-10濃度均顯著低于A、B、C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在血清中，A組、B組、C組、D組中IL-10濃度兩兩之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。在齦溝液中，IL-10濃度與AL呈負(fù)相關(guān)關(guān)系（r=-0.324,

9、 P<0.05）。⑸B組、C組齦溝液中TGF-β濃度均顯著高于A組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P<0.05）；C組齦溝液中TGF-β濃度顯著高于B組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；D組齦溝液中TGF-β濃度均顯著低于A、B、C組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在血清中，A組、B組、C組、D組中TGF-β濃度兩兩之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。⑹IL-10與TGF-β的相關(guān)性。在齦溝液中， IL-10濃度與 TGF-β濃度呈正相關(guān)關(guān)系（ r

10、=0.794, P<0.01)。⑺在A組、B組、C組、D組中，IL-17、IL-23、IL-10、TGF-β在齦溝液中的濃度均顯著高于血清，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論：①牙齦炎組、慢性牙周炎輕度組、慢性牙周炎中重度組齦溝液及血清中IL-17、IL-23的表達(dá)水平高于正常對(duì)照組，且隨著牙周探診深度和附著喪失程度的加重IL-17、IL-23表達(dá)增加。IL-17、IL-23的表達(dá)與慢性牙周炎發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)，可以反映牙周組

11、織破壞的程度。②齦溝液及血清中IL-17和IL-23的濃度均呈正相關(guān)關(guān)系，慢性牙周炎的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中存在IL-23/IL-17炎性軸。③牙齦炎組、慢性牙周炎輕度組齦溝液中IL-10、TGF-β的表達(dá)水平高于正常對(duì)照組，慢性牙周炎中重度組齦溝液中IL-10、TGF-β的水平低于正常對(duì)照組，而血清中這四組IL-10、TGF-β的濃度無(wú)明顯差異，說(shuō)明Treg細(xì)胞主要在慢性牙周炎局部組織中發(fā)揮免疫抑制作用。④IL-17、IL-23的表達(dá)水平隨牙