眼表載藥多肽超分子水凝膠給藥的研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?
　　本研究試圖構(gòu)建并評(píng)價(jià)一種新型多肽超分子水凝膠(Nap-GFFY)用于局部遞送眼科藥物雙氯芬酸鈉(DIC)。雙氯芬酸鈉裝載的Nap-GFFY多肽超分子水凝膠能有效增加藥物角膜穿透能力，從而提高眼部生物利用度，進(jìn)一步減少藥物的不良反應(yīng)。
　　實(shí)驗(yàn)方法:
　　本實(shí)驗(yàn)首先通過標(biāo)準(zhǔn)Fmoc固相多肽合成(SPPS)方法合成Nap-GFFY多肽序列（2-萘乙酸-甘氨酸-苯丙氨酸-苯丙氨酸-酪氨酸）。然后取5mg的Na

2、p-GFFY多肽和1倍當(dāng)量的無水碳酸鈉(Na2CO3)加入到1ml磷酸鹽緩沖液(PBS，pH=7.4)中，然后80℃條件下超聲5min獲得透明的液體。冷卻2min后形成0.5％Nap-GFFY空白多肽超分子水凝膠。進(jìn)一步通過將一定量雙氯芬酸鈉與空白的Nap-GFFY多肽超分子水凝膠通過簡(jiǎn)單的物理混合實(shí)現(xiàn)藥物裝載。隨后對(duì)Nap-GFFY多肽超分子水凝膠進(jìn)行理化性質(zhì)的表征，包括透射電鏡(TEM)觀察其形貌和流變儀檢測(cè)其流體學(xué)性能。采用CCK

3、-8法評(píng)價(jià)Nap-GFFY多肽超分子水凝膠對(duì)人角膜上皮細(xì)胞(HCEC),人晶狀體上皮細(xì)胞(HLEC)和小鼠成纖維細(xì)胞（L929細(xì)胞）的體外細(xì)胞毒性。之后體外藥物釋放考察不同藥物裝載量對(duì)于藥物釋放速率的影響。采用德雷茲染眼實(shí)驗(yàn)(Draize test)、熒光素鈉染色及H&E染色綜合評(píng)價(jià)空白Nap-GFFY多肽超分子水凝膠和載藥Nap-GFFY多肽超分子水凝膠的眼刺激性和眼組織相容性。最后采用兔眼結(jié)膜囊下給予50μl不同藥物制劑，考察藥物代

4、謝動(dòng)力學(xué)。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
　　通過熱誘導(dǎo)策略成功制備了澄清透明的Nap-GFFY多肽超分子水凝膠。親水性藥物雙氯芬酸鈉裝載不會(huì)影響Nap-GFFY多肽超分子水凝膠的自組裝。透射電鏡觀察結(jié)果顯示雙氯芬酸鈉裝載的Nap-GFFY多肽超分子水凝膠是由柔性的納米纖維構(gòu)成的。納米纖維的直徑約為15-30nm，長(zhǎng)度均超過20μm，并通過互相纏繞形成了水凝膠特征性的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。流變學(xué)結(jié)果顯示，裝載雙氯芬酸鈉會(huì)導(dǎo)致水凝膠力學(xué)性能降低。體外釋

5、放實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示雙氯芬酸鈉能緩慢的從 Nap-GFFY多肽超分子水凝膠中釋放出來。此外，初始藥物裝載量對(duì)于藥物的釋放速率有顯著影響，即藥物裝載量越高，釋放速率越快。體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示Nap-GFFY多肽超分子水凝膠在5-320μg/ml濃度范圍內(nèi)對(duì)于HCEC，HLEC和L929細(xì)胞系無明顯細(xì)胞毒性。兔眼刺激性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示空白Nap-GFFY多肽超分子水凝膠和雙氯芬酸鈉裝載的Nap-GFFY多肽超分子水凝膠制劑均無明顯的眼刺激性。體內(nèi)

6、藥物代謝動(dòng)力學(xué)結(jié)果顯示雙氯芬酸鈉裝載的Nap-GFFY多肽超分子水凝膠組的房水藥物濃度峰值(Cmax)和藥-時(shí)曲線下面積(AUC0-8h)分別約為市售雙氯芬酸鈉滴眼液組的4倍和3倍，這說明載藥Nap-GFFY多肽超分子水凝膠制劑能有效的提高藥物眼表給藥后的生物利用度。
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)論:
　　Nap-GFFY多肽超分子水凝膠具有良好的眼組織相容性，并能顯著提高眼表給藥后雙氯芬酸鈉的生物利用度，從而降低制劑藥物濃度，減少不良反應(yīng)，