電針改善COH小鼠胚胎著床中IGF-1的表達及最佳治療時間的研究.pdf

1、目的
　　本實驗用控制性超促排卵小鼠為研究對象，運用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcriotion-polymerase chain reaction，RT-PCR）技術(shù),以及蛋白質(zhì)印跡法（western blot），觀察電針對控制性超促排卵（controlled ovarian hyperstimulation，COH）小鼠子宮內(nèi)膜IGF-1表達的影響，并通過統(tǒng)計對比觀察針刺介入的最佳治療時間。
　　方法

2、
　　將雌性小鼠稱重標記后隨機分為自然周期組、COH組、降調(diào)節(jié)組、Gn啟動組、HCG組和胚胎移植日組。自然組不做任何打藥處理。COH組和電針組小鼠建立長期超促排卵小鼠模型:首先開始降調(diào)節(jié)，每天上午9時定時腹腔注射曲普瑞林（GnRh-a）0.02μg/g，連續(xù)9天，并于第9天下午6點注射孕馬血清促性腺激素（Pregnant Mare Serum Gonadotropin，PMSG）10IU；46-48小時后注射絨促性激素（human

3、 chorionic gonadotropin， HCG）10IU。電針組中的降調(diào)節(jié)組在開始降調(diào)節(jié)當天介入電針治療；Gn啟動組在注射PMSG后的當天介入電針治療；HCG組在注射HCG后的當天介入電針治療；胚胎移植日組在胚胎移植后的當天介入電針治療。取“關(guān)元”、“中極”、“三陰交”穴，在每天相同的時間點予電針治療，每次15分鐘。1次/日,直至取材停止針刺。在HCG注射后的當天與雄鼠混籠，然后取胚、培養(yǎng)、移植。移植后第三天處死取材。觀察妊娠

4、率和胚胎著床位點數(shù)， RT-PCR檢測子宮內(nèi)膜IGF-1 mRNA，Western blot檢測IGF-1蛋白表達。
　　結(jié)果
　　1.經(jīng)控制性超促排卵后，COH組妊娠率顯著低于自然周期組，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；在Gn啟動組、HCG組和胚胎移植日組行電針治療后，妊娠率較COH組顯著提高，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），但HCG組和胚胎移植日組效果最理想，與Gn啟動組相比，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；在降調(diào)

5、節(jié)組行電針治療后，妊娠率反而降低，與 COH組相比，具有顯著性差異（P＜0.01）。
　　2.經(jīng)控制性超促排卵后，COH組小鼠子宮的平均著床位點數(shù)顯著低于自然周期組，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01）；經(jīng)過電針治療后，HCG組是電針組中平均著床位點數(shù)最高的一組，與COH組相比顯著增加，差異具有顯著性（P＜0.01）；但降調(diào)節(jié)組、Gn啟動組和胚胎移植日組均未能明顯改善平均著床位點數(shù)。
　　3.各組小鼠的子宮內(nèi)膜均有 IGF-1

6、mRNA的表達；經(jīng)過超促排卵造模后， COH組子宮內(nèi)膜IGF-1 mRNA表達顯著性減少，與自然周期組相比，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；電針治療后，HCG組和胚胎移植日組表達增加，與COH組相比，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義，但HCG注射日組增加更顯著（P＜0.05）。
　　4.各小組子宮內(nèi)膜均有 IGF-1蛋白的表達。經(jīng)過造模之后，子宮內(nèi)膜IGF-1蛋白的相對表達量顯著降低，COH組明顯低于自然組，且具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；經(jīng)

7、過電針治療后，電針組的表達量均高于COH6組，具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；HCG組小鼠子宮內(nèi)膜IGF-1蛋白的表達量為6組中最高，與自然周期組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。
　　結(jié)論
　　1.電針能影響胚胎移植的著床率，當在注射HCG后介入電針治療，著床率最高。
　　2. IGF-1參與胚胎著床的過程。
　　3.電針能影響胚胎著床過程中，子宮內(nèi)膜 IGF-1的表達，當在注射 HCG后介入電針治療，子宮內(nèi)