上皮鈉離子通道基因DNA甲基化與原發(fā)性高血壓的關(guān)聯(lián)性研究.pdf

1、目的：1、探索 SCNN1A、SCNN1B基因 DNA甲基化水平與原發(fā)性高血壓的關(guān)系；2、初步探究 SCNN1A、SCNN1B基因 DNA甲基化水平是否受降壓藥治療的影響，為寧波市漢族人群高血壓的預(yù)防和抗壓藥物的研發(fā)提供理論依據(jù)。
　　方法：1、按年齡和性別匹配，選取寧波市漢族居民282人作為研究對(duì)象，采用1:1:1匹配確定對(duì)照組94例，新發(fā)病例組94例，既往病例組94例。通過統(tǒng)一的調(diào)查問卷獲取三組對(duì)象的基本資料（身高、體重、年齡

2、、吸煙史、飲酒史、疾病史等），經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)獲得血糖、甘油三酯、總膽固醇等生化指標(biāo)。運(yùn)用 Lab-Aid核酸分離試劑盒及核酸提取儀提取血液 DNA。
　　2、采用焦磷酸測(cè)序儀檢測(cè) SCNN1A、SCNN1B基因各6個(gè)CpG位點(diǎn)的甲基化水平。經(jīng)過性別年齡匹配后篩選出180例 SCNN1A基因測(cè)序成功的樣本，其中對(duì)照組60例，新發(fā)病例組60例，既往病例組60例。SCNN1B基因的甲基化水平在282例樣本中均測(cè)序成功，其中對(duì)照組94例，新

3、發(fā)病例組94例，既往病例組94例。
　　3、采用 Logistic回歸分析法尋找與血壓有關(guān)的甲基化位點(diǎn)，并初步分析高血壓患者中 CpG的甲基化水平是否受降壓藥治療的影響。
　　結(jié)果：
　　1、SCNN1A編碼區(qū)的6個(gè)位點(diǎn)甲基化水平關(guān)聯(lián)性很強(qiáng)（r>0.8，P>0.01），將6個(gè)位點(diǎn)求均數(shù)分析結(jié)果顯示，在男性中，新發(fā)病例組 CpG1-6甲基化水平比對(duì)照及既往病例高（對(duì)照比新發(fā)病例(％)：10.89±4.78比15.53±4

4、.83，adjusted P=0.001；既往病例比新發(fā)病例(%)：12.67±3.88比15.53±4.83，adjusted P=0.044）。在對(duì)照與既往的比較中卻不存在差異（既往病例比對(duì)照(%)：12.67±3.88比10.89±4.78，adjusted P=0.207）。
　　2、女性中 SCNN1A基因編碼區(qū) CpG1-6甲基化水平在對(duì)照組中顯著高于男性（男比女(%)：10.89±4.78比15.13±4.68，P=

5、0.002）。此外，該基因甲基化水平與年齡存在正相關(guān)（adjusted r=0.213，adjusted P=0.004）。
　　3、SCNN1B基因啟動(dòng)子區(qū)域的6個(gè)CpG位點(diǎn)關(guān)聯(lián)性不強(qiáng)，因而將6個(gè)位點(diǎn)獨(dú)立分析。結(jié)果顯示，女性中新發(fā)病例組的CpG1甲基化水平比對(duì)照組及既往病例組高(對(duì)照比新發(fā)病例(%)：16.87±4.37比18.34±4.07，adjusted P=0.031；既往病例比新發(fā)病例(%)：16.00±2.60比18

6、.34±4.07，adjusted P=0.001)，而女性中對(duì)照組 CpG2的甲基化水平比兩病例組高(對(duì)照比新發(fā)病例(%)：10.45±2.89比9.44±2.26，adjusted P=0.016；對(duì)照比既往病例(%)：10.45±2.89比9.05±1.525，adjusted P=0.001)。
　　4、對(duì)照組女性 CpG1和CpG2甲基化水平均比男性高（男比女(CpG1%)：15.06±3.23比16.87±3.87，P

7、=0.025；男比女(CpG2%)：9.26±2.43比10.45±2.90，P=0.012），新發(fā)病例組也顯示女性高于男性（男比女(CpG1%)：15.58±3.52比18.34±4.07，P=0.009；男比女(CpG2%)：8.52±2.15比9.44±2.26，P=0.011）。CpG1和CpG2甲基化水平與年齡均存在正相關(guān)(CpG1：adjusted r=0.311，adjusted P=0.000；CpG2：adjusted

8、 r=0.161，adjusted P=0.008)。
　　結(jié)論：
　　1、男性中 SCNN1A基因 CpG1-6及女性中 SCNN1B基因 CpG1的高甲基化與 CpG2的低甲基化為原發(fā)性高血壓的危險(xiǎn)因素，在降壓藥物的作用下，這些位點(diǎn)的甲基化水平均顯著下降。
　　2、女性中 SCNN1A基因編碼區(qū)6個(gè)位點(diǎn)的甲基化水平與 SCNN1B基因中的CpG1、 CpG2的甲基化水平均顯著高于男性，且甲基化水平與年齡存在正相關(guān)。