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1、目的:本研究試圖運(yùn)用代謝組學(xué)研究思路和技術(shù)驗(yàn)證前期研究結(jié)果對(duì)于兒童紫癜性腎炎中醫(yī)分型的合理性;明確兒童紫癜性腎炎尿液代謝物的變化特點(diǎn),探索疾病的生物標(biāo)志物;明確兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證尿液代謝物的變化特點(diǎn),探索證候的生物標(biāo)志物;從代謝組學(xué)水平探討兒童紫癜性腎炎中醫(yī)證型的物質(zhì)基礎(chǔ)及診斷標(biāo)準(zhǔn)。
方法:采集符合納入標(biāo)準(zhǔn)的兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證及非熱傷腎絡(luò)證患兒各9例,及健康體檢者22例的空腹晨尿中段尿,-80℃冰箱存儲(chǔ),樣本采集齊
2、后利用超高液相色譜-離子肼質(zhì)譜系統(tǒng)進(jìn)行譜圖掃描,取得各樣品的代謝指紋譜,經(jīng)譜圖預(yù)處理,得出具有保留時(shí)間、質(zhì)荷比、峰面積的三維數(shù)據(jù),利用多元統(tǒng)計(jì)分析方法中的主成分分析考察樣本分布總體情況,進(jìn)一步使用偏最小二乘法及經(jīng)正交校正的偏最小二乘法對(duì)各組的代謝指紋譜進(jìn)行比較,根據(jù)載荷圖,以及主成分貢獻(xiàn)值及T檢驗(yàn),得出區(qū)別各組間的重要化合物,這些化合物可能是疾病和證型的“生物標(biāo)記物群”。
結(jié)果:(1)兒童紫癜性腎炎和正常對(duì)照之間可以明顯區(qū)分。
3、(2)兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證和正常對(duì)照組可以明顯區(qū)分。(3)兒童紫癜性腎炎非熱傷腎絡(luò)證組樣本分布較散亂。(4)根據(jù)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索,區(qū)別兒童紫癜性腎炎的化合物可能是羥基絡(luò)醇4-硫酸酯、精氨酰絲氨酸、雌酮、色氨酰蛋氨酸、維生素K2、鈍葉素葡萄糖苷、S-氨甲基二氫硫、苯丙精氨酸、L-蛋氨酸、同型半胱氨酸硫內(nèi)酯、膽甾-3,7,12,25四醇-3-葡糖苷酸、磷脂酰膽堿、乙酰乙酸、N2,N2-二甲基鳥(niǎo)苷;區(qū)別兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證的化合物可能是丙酸
4、、醛固酮、均聚L-精氨酸、維生素K2、鈍葉素葡萄糖苷、S-氨甲基二氫硫、苯丙精氨酸、L-蛋氨酸、同型半胱氨酸硫內(nèi)酯、羥基絡(luò)醇4-硫酸酯、精氨酰絲氨、雌酮、色氨酰蛋氨。
結(jié)論:(1)代謝組學(xué)的研究方法可以成功區(qū)分兒童紫癜性腎炎和正常對(duì)照組,可能的差異化合物有羥基絡(luò)醇4-硫酸酯、精氨酰絲氨酸、雌酮、色氨酰蛋氨酸、維生素K2、鈍葉素葡萄糖苷、S-氨甲基二氫硫、苯丙精氨酸、L-蛋氨酸、同型半胱氨酸硫內(nèi)酯、膽甾-3,7,12,25四醇-
5、3-葡糖苷酸、磷脂酰膽堿、乙酰乙酸、N2,N2-二甲基鳥(niǎo)苷。(2)代謝組學(xué)的研究方法可以成功區(qū)分兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證和正常對(duì)照組,可能的差異性化合物是丙酸、醛固酮、均聚L-精氨酸、維生素K2、鈍葉素葡萄糖苷、S-氨甲基二氫硫、苯丙精氨酸、L-蛋氨酸、同型半胱氨酸硫內(nèi)酯、羥基絡(luò)醇4-硫酸酯、精氨酰絲氨酸、雌酮、色氨酰蛋氨酸。(3)兒童紫癜性腎炎熱傷腎絡(luò)證其代謝表征的確發(fā)生了變化,前期兒童紫癜性腎炎中醫(yī)證型的研究結(jié)果中對(duì)于熱傷腎絡(luò)證證型
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