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文檔簡介
1、目的:依據(jù)我國新疆阿克蘇碘缺乏病傳統(tǒng)疫區(qū)居民的膳食模式,以當?shù)鼐用裰饕巢臑樵?,模擬該地區(qū)人群膳食碘攝入量配制不同碘含量水平的飼料,采用“三代兩窩法”建立大鼠碘缺乏模型,研究長期持續(xù)碘缺乏對大鼠子二代甲狀腺功能及其調控機制的影響。
方法:采用新疆阿克蘇碘缺乏病高發(fā)地區(qū)所種植的糧谷類為主要材料,按GB14924.3-2010《實驗動物配合飼料營養(yǎng)成分》為參考配制低碘飼料(碘含量分別為50μg/kg,20μg/kg)。選擇斷乳后
2、的SPF級Wistar大鼠60只,雌雄各半,適應性飼養(yǎng)約2周后,隨機分為3組:正常對照組(NI),低碘一組(LI),低碘二組(LII),NI組飼喂大鼠生長維持飼料,碘含量約為300μg/kg;LI組飼喂碘含量約為50μg/kg的飼料;LII組飼喂碘含量約為20μg/kg的飼料。各組大鼠喂養(yǎng)三個月后,各雌鼠與正常組雄鼠進行1:1合籠,出生的子鼠按同樣方法飼養(yǎng)3個月再進行傳代一次,所出生的子鼠即子二代鼠作為研究對象。子二代鼠從出生開始與母鼠
3、同籠飼養(yǎng),其飼料仍與親代相同,按不同組別給予不同碘含量的飼料,保證這一批大鼠在其生命全過程均處于碘營養(yǎng)缺乏狀態(tài)。在大鼠子二代干預過程中動態(tài)監(jiān)測子二代大鼠體重、進食量、食物利用率,以及達30日齡、90日齡的仔鼠的體重、身長、尾長和后腿長。在喂養(yǎng)至90天,180天,270天時采血處死,取全血檢測血常規(guī);分離血清,檢測血液生化指標及血清甲狀腺激素水平(T3。T4,F(xiàn)T3,F(xiàn)T4,rT3);取各臟器,稱取重量并計算臟器系數(shù);取甲狀腺,稱重計算甲
4、狀腺絕對重量和相對重量,稱重完進行固定后,觀察甲狀腺大體外觀及光鏡下組織變化,運用Westrn Blotting方法檢測甲狀腺鈉碘轉運體蛋白表達水平。
結果:
1.尿碘含量降低子二代大鼠LI組和LII組尿碘水平低于NI組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
2.碘缺乏對大鼠基本情況的影響
2.1.子二代大鼠一般情況子二代碘缺乏大鼠從其幼鼠就開始明顯表現(xiàn)出體格小等生長發(fā)育遲緩表現(xiàn)。在其幼鼠期,子二代
5、大鼠情緒較對照組同齡大鼠無明顯差異,且情緒反應和活躍程度相較于正常對照組,隨碘缺乏時間的延長,表現(xiàn)出其活躍度逐漸降低,顯得動作遲緩,并出現(xiàn)毛發(fā)脫落等現(xiàn)象。
2.2.基本血液指標的變化
2.2.1.血常規(guī):干預90天時,LI組和LII組紅細胞數(shù)、紅細胞壓積和血紅蛋白濃度高于正常對照組(P<0.05)。白細胞在干預90天和180天時,LI組和LII組均低于NI組(P<0.01)。干預90天時,LI組和LII組淋巴細胞數(shù)低
6、于NI組(P<0.01),淋巴細胞比率則高于NI組(P<0.01)。
2.2.2.生化指標:TG在干預90天、180天、270天時,LI組和LII組均低于NI組(P<0.01)。TC在干預90天和180天時,LI、LII組低于NI組(P<0.01)。碘缺乏組血糖低于正常對照組(P<0.05)。LI組和LII組尿素氮水平在各干預時期均明顯低于NI組(P<0.01)。
2.3.各臟器系數(shù)的變化低碘干預的各干預時期,子二代
7、大鼠心臟、肺臟、和腎臟臟器系數(shù),LI組和LII組大于NI組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.01)。
2.4.子二代大鼠體重、進食量和食物利用率的變化子二代雌鼠和雄鼠體重在干預前期,各組間差異不明顯,但是隨干預時間的延長,差異越來越明顯,LI組和LII組大鼠體重明顯小于同日齡同性別NI組大鼠(P<0.01)。進食量在各干預時期,LI組和LII組大鼠的進食量低于同日齡同性別NI組大鼠(P<0.01)。生物利用率在各干預時
8、期,兩個碘缺乏組與正常對照組差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。
2.5.碘缺乏子二代仔鼠生長發(fā)育指標的變化當子二代仔鼠在30日齡時,LI組和LII組的體重,身長,尾長和后腿長度均低于NI組(P<0.01);達60日齡時,LI組和LII組子鼠上述指標仍低于NI組(P<0.01)。
3.碘缺乏對大鼠甲狀腺功能和形態(tài)的影響及其調控機制
3.1.甲狀腺絕對重量和相對重量在低碘干預90天、180天及270天時,LI組
9、和LII組甲狀腺絕對重量和相對重量均大于NI組(P<0.01),并且LII組大于LI組(P<0.01)。
3.2.甲狀腺外觀及組織學變化
3.2.1.外觀:觀察大鼠甲狀腺大體外觀結果顯示,NI組大鼠甲狀腺質地軟,呈淡粉色;LI組和LII組大鼠分別觀察到不同程度的腫大大,其質地偏硬,充血,并且隨飼料碘含量的降低、干預時間的延長,腫大充血程度更嚴重。
3.2.2.組織學改變:在光鏡下,NI組大鼠甲狀腺濾泡較完整
10、,腔內充滿膠質,其上皮細胞完整且多呈現(xiàn)扁平狀;LI組和LII組大鼠甲狀腺濾泡腔不完整,腔內膠質混亂,有的甚至缺如,當大鼠碘缺乏干預90天和180天時,甲狀腺上皮細胞呈現(xiàn)從扁平上皮轉變?yōu)橹鶢钌掀罡淖儯敻深A時期達270天時,上皮細胞呈現(xiàn)又變回扁平上皮的趨勢。
3.3.血清甲狀腺激素水平的改變LI組和LII組干預90天時T3,F(xiàn)T3和rT3低于NI組(P<0.01);干預180天時,T4和FT4小于NI組(P<0.01);干預2
11、70天時T3,T4,F(xiàn)T3,F(xiàn)T4,rT3低于NI組(P<0.05,P<0.01)。
3.4.大鼠甲狀腺 NIS蛋白表達水平的變化不同干預時期,大鼠甲狀腺 NIS蛋白表達情況基本上是,LI組和LII組NIS蛋白表達量明顯高于NI組;并且LII組的表達量稍高于LI組。
結論:
1.碘缺乏大鼠子二代各干預階段尿碘水平降低,提示本研究成功建立碘缺乏動物模型。
2.從子二代大鼠一般情況的觀察發(fā)現(xiàn),如其活動
12、度、情緒等主觀表現(xiàn),并且從30日齡和60日齡的仔鼠的生長發(fā)育指標的變化來看,長期持續(xù)碘缺乏導致子二代大鼠生長發(fā)育遲緩,并對神經(jīng)心理方面產生較明顯的影響。
3.長期持續(xù)碘缺乏對大鼠子二代的體重、進食量以及食物利用率產生影響,并且隨干預時間的延長、碘缺乏程度而加深,同時,從其血液學相關指標發(fā)育及組織器官結構改變看出,碘缺乏引起的甲狀腺激素合成不足通過影響營養(yǎng)物質的吸收、代謝、合成、分解等多方面,對機體整體生理功能產生了影響,并可能
13、從對機體產生影響。
4.長期持續(xù)碘缺乏會導致甲狀腺激素合成不足,引起甲狀腺代償性增生肥大及其超微結構異常改變,表現(xiàn)為以甲狀腺腺體外觀及組織學異常為表現(xiàn)的器質性損傷,進而引起甲狀腺功能障礙,最終影響機體整體的正常代謝功能。并且,碘缺乏導致的機體由于甲狀腺激素不足引起甲狀腺NIS蛋白表達上調,而同時,受機體負反饋調節(jié)的影響,甲狀腺功能的改變可能與其NIS蛋白表達上調有關。
5.本研究結果發(fā)現(xiàn),長期持續(xù)碘缺乏對大鼠子二代從
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