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文檔簡介
1、實驗目的:
研究HIF-1α與吳茱萸堿抑制人結腸癌LOVO細胞增殖作用的關系,以及吳茱萸堿調節(jié)HIF-1α表達的可能機制。
實驗方法:
采用結晶紫染色、流式細胞術、報告質粒、RT-PCR、WB等實驗技術,研究吳茱萸堿抑制人結腸癌LOVO細胞增殖與HIF-1α關系,以及吳茱萸堿調節(jié)HIF-1α表達的可能分子機制。實驗步驟如下:
1、采用結晶紫染色、FCM、WB等技術,檢測吳茱萸堿對人結腸癌LOVO細
2、胞增殖、凋亡的影響。
2、采用報告質粒、RT-PCR和WB檢測吳茱萸堿對人結腸癌LOVO細胞中HIF-1α影響。
3、采用重組腺病毒技術,檢測HIF-1α過表達和沉默表達后,吳茱萸堿對人結腸癌LOVO細胞增殖的影響。
4、檢測吳茱萸堿對人結腸癌LOVO細胞中Akt1/2、p-Akt1/2、IGF-1表達的影響。利用IGF-1過表達腺病毒,分析其對結腸癌細胞中Akt1/2、p-Akt1/2/表達的影響。
3、> 實驗結果:
1、吳茱萸堿抑制人結腸癌LOVO細胞增殖,將細胞阻滯于S期,并誘導其凋亡。
2、吳茱萸堿明顯抑制人結腸癌LOVO細胞中HIF-1α表達,并抑制HIF-1α報告質?;钚浴?br> 3、沉默表達HIF-1α增強吳茱萸堿抑制人結腸癌LOVO細胞增殖作用,過表達HIF-1α減弱吳茱萸堿抑制人結腸癌LOVO細胞增殖作用。
4、吳茱萸堿能抑制細胞中p-Akt1/2、IGF-1表達;外源性過表達IGF
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