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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
探討體外培養(yǎng)的膽囊癌細(xì)胞中,Heparanase基因過(guò)表達(dá)與Syndecan-1表達(dá)的相關(guān)性及其與膽囊癌細(xì)胞侵襲力的關(guān)系。
方法:
1.分別將Heparanase基因過(guò)表達(dá)的GBD-SD和Heparanase基因正常表達(dá)GBC-SD進(jìn)行體外培養(yǎng),傳代和凍存,觀查其在體外生長(zhǎng)的特點(diǎn),繪制出細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線。
2.應(yīng)用Western-blot方法分別檢測(cè)GBD-SD和GBC-SD中Syndeca
2、n-1的蛋白表達(dá)量。
3.應(yīng)用RT-PCR技術(shù)分別檢測(cè)GBD-SD和GBC-SD中Syndecan-1的基因表達(dá)量。
4.應(yīng)用Transwell小室法分別對(duì)GBD-SD和GBC-SD的侵襲力進(jìn)行檢測(cè)。
結(jié)果:
1.成功復(fù)蘇了GBD-SD和GBC-SD并將其進(jìn)行傳代培養(yǎng)和凍存,繪制出細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,熟悉了膽囊癌細(xì)胞體外生長(zhǎng)的特征。
2. GBD-SD中的Syndecan-1蛋白表達(dá)比GBC-
3、SD中的Syndecan-1蛋白表達(dá)明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3. GBD-SD中Syndecan-1的mRNA比GBC-SD中Syndecan-1的mRNA明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
4. GBD-SD的細(xì)胞侵襲數(shù)目明顯多于GBC-SD的細(xì)胞侵襲數(shù)目,GBD-SD比GBC-SD表現(xiàn)出更強(qiáng)的侵襲能力,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
1.在膽囊癌細(xì)胞
4、中,Heparanase基因過(guò)表達(dá)與Syndecan-1的表達(dá)呈現(xiàn)負(fù)相關(guān)性,與膽囊癌細(xì)胞的侵襲力呈現(xiàn)正相關(guān)性。
2.在膽囊癌細(xì)胞中,Heparanase的表達(dá)增多,Syndecan-1的表達(dá)減少,其侵襲力增強(qiáng);Heparanase/Syndecan-1軸在膽囊癌的侵襲浸潤(rùn)過(guò)程中具有重要的作用。
3. Heparanase/Syndecan-1軸的研究為膽囊癌的診斷和治療提供了新的思路和方法,同時(shí)為開(kāi)發(fā)以Heparan
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