急性冠脈綜合征患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中aHIF及MIAT的初步研究.pdf

1、冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病(coronary artery heart disease,CHD）簡(jiǎn)稱(chēng)冠心病，是指由多種致病因素導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈（冠脈）粥樣硬化，從而引起管腔狹窄或閉塞，導(dǎo)致心肌缺血缺氧或壞死而引起的心臟疾病。急性冠脈綜合征(Acute coronary syndrome，ACS)是冠心病中最嚴(yán)重、最常見(jiàn)的類(lèi)型，是心血管疾病中致死、致殘的主要原因，近年來(lái)發(fā)病呈年輕化趨勢(shì)，嚴(yán)重威脅著人類(lèi)健康。ACS的早期診斷及準(zhǔn)確及時(shí)的病情和預(yù)后

2、估計(jì)是采取有效治療措施并保證心臟及時(shí)再灌注以減少死亡率的必要條件。許多學(xué)者運(yùn)用各種生物學(xué)標(biāo)志物從冠心病的病理生理機(jī)制，如氧化應(yīng)激、炎癥、心肌損傷等方面研究并揭示了它們與疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律等方面的相關(guān)性，對(duì)冠心病的診斷、治療及管理發(fā)揮了重要作用。然而，單一的生物標(biāo)志物一般只反映疾病發(fā)生的某個(gè)環(huán)節(jié)，檢測(cè)也具有局限性，因此國(guó)內(nèi)外不少學(xué)者推薦多種生物標(biāo)志物聯(lián)合診斷冠心病，從多方面評(píng)估病情，并為疾病治療提供有效靶點(diǎn)。
　　研究表明，長(zhǎng)鏈非

3、編碼 RNA（lncRNAs）能以 RNA的形式在多種層面上調(diào)控基因的表達(dá)，參與劑量補(bǔ)償效應(yīng)、細(xì)胞發(fā)育分化、基因組印記等重要生物學(xué)過(guò)程，成為當(dāng)前心血管疾病研究的熱點(diǎn)之一。國(guó)內(nèi)學(xué)者研究發(fā)現(xiàn) lncRNAs能促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化炎癥反應(yīng)。lncRNA-MIAT（心肌梗死相關(guān)轉(zhuǎn)錄本）轉(zhuǎn)錄區(qū)內(nèi)多個(gè) SNPs（單核苷酸多態(tài)性）與心肌梗死易感性相關(guān),可能在轉(zhuǎn)錄后水平（剪接）調(diào)節(jié)基因表達(dá)，但 MIAT在心梗的作用機(jī)制仍不明確。反義 RNA2缺氧誘導(dǎo)因子1

4、α（lncRNA-aHIF）是一種天然的HIF1α（缺氧誘導(dǎo)因子1α）反義轉(zhuǎn)錄本，在心衰患者中表達(dá)升高，通過(guò)調(diào)節(jié) HIF1α的 mRNA來(lái)調(diào)控新生血管生成，這對(duì)心肌缺血而言是一種重要的反饋調(diào)節(jié)?；谝陨涎芯勘菊n題組推測(cè)lncRNAs可能為冠心病領(lǐng)域新的生物學(xué)標(biāo)記物和治療靶點(diǎn)，但是目前相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道較少，因此本實(shí)驗(yàn)對(duì) ACS患者外周血單個(gè)核細(xì)胞（PBMCs）中 aHIF及MIAT進(jìn)行初步研究，以考察兩者與ACS患者之間的關(guān)聯(lián)性。
　　

5、目的:
　　1．探究aHIF、MIAT在A(yíng)CS患者中表達(dá)水平以及是否對(duì)ACS有診斷價(jià)值。
　　2．分析aHIF、MIAT是否具有預(yù)測(cè)冠脈病變嚴(yán)重程度的作用。
　　3．探究aHIF、MIAT與cTnI、CK-MB之間的相關(guān)性。
　　方法:
　　按照本研究的納入標(biāo)準(zhǔn)和排除標(biāo)準(zhǔn)收集2015年5月至2015年12月期間于廣州醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院心血管內(nèi)科住院部105例急性冠脈綜合征（ACS）患者的外周血標(biāo)本，其中急

6、性心肌梗死（AMI）患者和不穩(wěn)定型心絞痛（UA）患者分別為55例和50例，依次簡(jiǎn)稱(chēng)ACS組、AMI組和UA組，其中將AMI組又分為非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)組和ST段抬高型心肌梗死(STEMI)組。選取60例同期非缺血性胸痛患者外周血標(biāo)本作為對(duì)照組。將所有入選患者根據(jù)病變血管支數(shù)又分為無(wú)病變血管組、單支病變組、兩支病變組和三支病變組。入院次日清晨空腹抽取所有患者靜脈血3mL，采用EDTA抗凝，分離
　　PBMCs中的總

7、RNA，采用實(shí)時(shí)熒光定量反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qRT-PCR）檢測(cè)各樣本aHIF和MIAT表達(dá)水平。將所有血標(biāo)本送至我院檢驗(yàn)科檢測(cè)肌鈣蛋白I（cTnI）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶MB同工酶（CK-MB）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、hs-CRP等指標(biāo)。所有數(shù)據(jù)采用SPSS18.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　1．年齡與性別在非 CHD對(duì)照組與 ACS組之間無(wú)明顯差異（P＞0.05），而吸煙史、糖尿病史、高密度

8、脂蛋白膽固醇、肌鈣蛋白I、肌酸肌酶、肌酸肌酶MB同工酶、糖化血紅蛋白水平在A(yíng)CS組高于對(duì)照組（P＜0.05）。
　　2．與非 CHD對(duì)照組相比較， aHIF表達(dá)水平在 ACS組明顯升高（ P＜0.05），MIAT表達(dá)水平在 ACS組明顯降低（P＜0.05）。且 aHIF在 UA組， NSTEMI組、STEMI組中表達(dá)較對(duì)照組均有上調(diào)（ P＜0.05），而 UA組、NSTEMI組及STEMI組三組之間無(wú)明顯差異。MIAT在NSTEM

9、I組、STEMI組中表達(dá)較對(duì)照組和UA組均有下調(diào)（P＜0.05），NSTEMI組與STEMI組兩組間無(wú)明顯差異，UA組與對(duì)照組之間無(wú)明顯差異。
　　3．a(chǎn)HIF在無(wú)病變血管組、單支病變組、兩支病變組及三支病變組之間無(wú)明顯差異。MIAT在兩支病變組較無(wú)病變血管組、單支病變組和三支病變組升高（P＜0.05），無(wú)病變血管組、單支病變組及三支病變組三組之間 PBMCs中MIAT表達(dá)水平無(wú)明顯差異。
　　4．a(chǎn)HIF、MIAT表達(dá)水平

10、均與 hs-CRP呈正相關(guān)（P＜0.05），r分別為0.316和0.308。
　　5．a(chǎn)HIF表達(dá)與 CK-MB（r=0.399）、cTnI（r=0.525）呈正相關(guān)（P＜0.05），而MIAT與CK-MB、cTnI尚未發(fā)現(xiàn)有明顯相關(guān)性。
　　6．建立受試者工作特征曲線(xiàn)評(píng)估 aHIF及 MIAT對(duì)于 ACS及 AMI診斷的價(jià)值，發(fā)現(xiàn)預(yù)測(cè) aHIF對(duì) ACS及 AMI的診斷價(jià)值相應(yīng)的 ROC曲線(xiàn)下面積分別為0.791（95％置

11、信區(qū)間：0.741～0.840，P＜0.01）、0.838（95%置信區(qū)間：0.78～0.895， P＜0.01），切點(diǎn)位置敏感度及特異度分別為60.2%、82%和59%、98%。MIAT對(duì)ACS及AMI診斷的ROC曲線(xiàn)面積均小于0.5。綜合aHIF及cTnI兩者聯(lián)合預(yù)測(cè)對(duì)ACS及AMI診斷價(jià)值，ROC曲線(xiàn)下面積、敏感度、特異度分別為0.891、81%、99%和0.998、96%、100%。
　　7．Gensini評(píng)分值與aHIF

12、（r=0.227，P＜0.05）表達(dá)水平呈弱正相關(guān)。而Gensini評(píng)分值與MIAT表達(dá)水平及Syntax評(píng)分值與aHIF、MIAT表達(dá)水平未見(jiàn)明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論:
　　1．a(chǎn)HIF的PBMCs中表達(dá)水平與ACS顯著正相關(guān)，有可能成為ACS，尤其是AMI診斷新的生物標(biāo)記物。MIAT對(duì)AMI的診斷可能有一定幫助。
　　2．a(chǎn)HIF與冠脈病變嚴(yán)重程度有一定相關(guān)性，聯(lián)合cTnI指標(biāo)進(jìn)行診斷可以提高ACS、AMI診斷效率。