多層紙芯片乳腺癌組織微陣列用于抗腫瘤藥物測(cè)試.pdf

1、本研究以多層紙芯片為技術(shù)平臺(tái)，構(gòu)建了乳腺癌組織微陣列并將之用于抗腫瘤藥物反應(yīng)測(cè)試。研究?jī)?nèi)容包括：
　　一、多層紙芯片上的乳腺癌組織微陣列構(gòu)建
　　目的：發(fā)展一種基于多層紙芯片的乳腺癌組織微陣列構(gòu)建方法。
　　方法：以噴蠟打印濾紙方法加工圖形化親水點(diǎn)陣，濾紙折疊后構(gòu)成多層紙芯片。多層紙芯片頂層打孔并覆以微孔薄膜，用以仿真血管內(nèi)皮層。將乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞分別接種于紙芯片各層親水區(qū)，折疊后浸入培養(yǎng)基中培養(yǎng)。在培養(yǎng)

2、的7天內(nèi)，拆解多層紙芯片檢測(cè)不同時(shí)間乳腺癌組織內(nèi)各層面的細(xì)胞形態(tài)、存活率、細(xì)胞周期分布以及細(xì)胞內(nèi)乳酸含量。
　　結(jié)果：培養(yǎng)7天內(nèi)，接種在紙芯片上的乳腺癌細(xì)胞增殖并形成類組織結(jié)構(gòu)，各層細(xì)胞存活率均保持在80％以上。芯片乳腺癌組織內(nèi)部呈酸化傾向，且酸化程度隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而升高。與2D培養(yǎng)細(xì)胞相比較，紙芯片乳腺癌組織內(nèi)細(xì)胞增殖比例顯著降低（60% vs15%）。
　　結(jié)論：所發(fā)展的紙芯片乳腺癌組織微陣列構(gòu)建方法操作簡(jiǎn)便、仿真度

3、高，有望成為腫瘤研究的有力工具。
　　二、多層紙芯片乳腺癌組織微陣列用于抗腫瘤藥物反應(yīng)測(cè)試
　　目的：發(fā)展一種基于多層紙芯片乳腺癌組織微陣列的抗腫瘤藥物反應(yīng)測(cè)試方法。
　　方法：乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞接種在紙芯片上培養(yǎng)后第二天，更換含有不同濃度鹽酸阿霉素的新鮮培養(yǎng)基。培養(yǎng)24h后取出濾紙，Calcein-AM/ PI染色，熒光顯微鏡觀察拍照，并利用 Photoshop軟件計(jì)算每層細(xì)胞存活率。同時(shí)，以96孔板培養(yǎng)

4、細(xì)胞做2D組對(duì)照實(shí)驗(yàn)。
　　結(jié)果：多層紙芯片乳腺癌組織顯示了更加接近體內(nèi)情況的藥物反應(yīng)機(jī)制，細(xì)胞存活率隨著阿霉素濃度升高呈現(xiàn)緩慢下降趨勢(shì)，IC50值顯著高于2D培養(yǎng)細(xì)胞組（5.0μmol/L vs1.144μmol/L）。
　　結(jié)論：紙芯片平臺(tái)有效、細(xì)致地仿真了體內(nèi)乳腺癌微環(huán)境。與傳統(tǒng)方法相比較，紙芯片藥物測(cè)試更為簡(jiǎn)便，仿真度高，測(cè)試結(jié)果也更加接近體內(nèi)實(shí)際情況。這種基于紙芯片的抗腫瘤藥物反應(yīng)測(cè)試方法有望為腫瘤個(gè)體化治療方案的