塞來昔布灌腸對AOM-DSS誘導小鼠潰瘍性結腸炎腸黏膜異型增生的防治作用及相關機制的實驗性研究.pdf

1、目的：潰瘍性結腸炎腸黏膜異型增生是以潰瘍性結腸炎為基礎疾病，經(jīng)炎癥反復刺激，使結直腸黏膜病理表現(xiàn)為黏膜上皮和腺體偏離正常分化，形態(tài)和機能上呈異型性表現(xiàn)的一種結直腸黏膜異型增生性疾病?，F(xiàn)潰瘍性結腸炎腸黏膜異型增生已明確為結直腸癌(colorectal cancer,CRC)的癌前病變之一，其發(fā)生可以使?jié)冃越Y腸炎（ulcerativecolitis，UC）的癌變率明顯增高，同時，其在UC癌變過程中起重要作用，目前針對該疾病較為明確的預防性

2、藥物為美沙拉秦。研究發(fā)現(xiàn)炎癥、增生及腫瘤等的發(fā)生與環(huán)氧化物酶COX-2的高表達有關。塞來昔布作為一種COX-2抑制劑，對炎癥、增生、腫瘤等的發(fā)生具有干擾作用。然而UC相關CRC與CRC具有一定的差異性，且塞來昔布經(jīng)口服可能存在肝腎功能異常、心血管等不良事件發(fā)生的可能，尤其在老年患者中。因此，本實驗主要探討不同濃度塞來昔布經(jīng)灌腸對潰瘍性結腸炎腸黏膜異型增生的防治作用,并分析其可能的作用機制。
　　方法：選擇4～5周齡C57BL/6雄

3、性小鼠共60只，將其隨機分為6組，每組10只，分別被標記為塞來昔布高劑量組(A組)、塞來昔布中劑量組(B組)、塞來昔布低劑量組(C組)、美沙拉秦組(D組)、模型組(E組)、空白組（F組）。適應性喂養(yǎng)小鼠一周后開始實驗，除空白組F組外，其他各組小鼠均通過氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸鈉（AOM/DSS）聯(lián)合法制備實驗動物模型，具體步驟為給予小劑量氧化偶氮甲烷AOM(10mg/kg)單次腹腔注射,一周后2％葡聚糖硫酸鈉DSS飲用7d，正常飲水14

4、d。建模第5d時，給予A組1.5 mg/mL高劑量塞來昔布灌腸、B組1.0 mg/mL中等劑量塞來昔布灌腸、C組0.5 mg/mL低劑量塞來昔布灌腸、D組60g:4g劑量美沙拉秦灌腸液灌腸、E組同等劑量0.9%氯化鈉注射液灌腸，每天一次，每次0.1mL/10g。實驗第4w末處死小鼠，肉眼觀察結直腸組織形態(tài)學變化，鏡下觀察結腸組織病理學改變及免疫組化標記物COX-2、BCL-2、CDX-2表達結果，Elisa法檢測血清細胞因子水平，實驗過

5、程中觀察各組小鼠毛色、體重、精神等一般情況改變。
　　結果:肉眼觀察較模型組E組，A、B兩組與F組相似，結直腸上皮黏膜表面光滑，血管紋理清晰，大便成型；C、D兩組結直腸上皮黏膜表面欠光滑，大便較成型。HE染色A、B兩組結直腸上皮黏膜較完整，腺體排列整齊，C組結直腸上皮黏膜伴有淺表性潰瘍，D組結直腸上皮黏膜偶伴有淋巴細胞浸潤現(xiàn)象，E組結直腸上皮黏膜主要表現(xiàn)為慢性炎癥伴輕-中度異型增生；與空白組F組相比，模型組E組IL-6、TNF-α

6、血清細胞因子水平明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），而各治療組IL-6、TNF-α水平較模型組E組明顯降低，其中A、B組TNF-α水平下降較其他治療組明顯，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與空白組F組相比，免疫組化檢測結果中模型組E組COX-2、BCL-2水平評分明顯升高，而CDX-2水平評分明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），各治療組COX-2、BCL-2水平評分較模型E組明顯降低，而CDX-2水平評分較模型組E組

7、明顯升高，其中治療組A、B兩組COX-2水平評分明顯低于C、D兩組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），治療組A、B、D三組BCL-2水平較C組評分低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），而治療組A、B、C、D四組CDX-2水平評分差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。
　　結論：塞來昔布灌腸對潰瘍性結腸炎腸黏膜異型增生具有一定的防治作用，其中高、中劑量塞來昔布灌腸效果較明顯；機制可能與塞來昔布抑制COX-2、BCL-2的表達，減少IL-