丁氏潰結灌腸液對DSS誘導的潰瘍性結腸炎大鼠腸道屏障作用的相關研究.pdf

1、目的:研究丁氏潰結灌腸液對葡聚糖硫酸鈉(Dextran Sulfate Sodium，DSS)誘導的潰瘍性結腸炎(Ulcerative Colitis，UC)大鼠的結腸組織中緊密連接蛋白(Occludin)、粘蛋白2(MUC2)和誘導型一氧化氮合酶(iNOS)、血清免疫球蛋白A(IgA)的影響，探討其可能的作用機制。
　　方法:隨機挑選10只大鼠，歸入到空白對照組，其余的50只通過飲用DSS水溶液的方法建立大鼠UC模型。模型復制成

2、功后，將參加造模的大鼠隨機的分為5組，即模型組、丁氏潰結灌腸液低劑量組、丁氏潰結灌腸液中劑量組、丁氏潰結灌腸液高劑量組、美沙拉秦灌腸液組。除空白對照組外，其余各組給予生理鹽水和相應藥物連續(xù)灌腸14d。治療14d后采用腹主動脈取血的方法，將全部大鼠處死，并剖取結腸標本。觀察大鼠的體重、大便性狀、便血情況及結腸組織的損傷變化并評分，評估疾病活動指數(shù)(Disease Activity Index，DAI)，肉眼觀察結腸組織大體情況并評分，光鏡

3、下觀察結腸組織病理損傷并評分，酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定血清IgA含量、蛋白質印跡(Western Blot)法檢測結腸組織Occludin蛋白水平、實時熒光定量PCR(Real-Time PCR)檢測結腸組織MUC2mRNA、iNOS mRNA表達水平。
　　結果:1、造模后大鼠精神萎靡、體重下降、大便溏稀伴有黏液膿血，DAI評分與空白對照組比較增高(P＜0.05)。灌腸治療后，丁氏潰結灌腸液組和美沙拉秦灌腸液組大鼠上述癥

4、狀好轉，DAI評分與模型組比較降低(P＜0.05)。其中丁氏潰結灌腸液低劑量組情況不及其他用藥祖，但也好于模型組。
　　2、肉眼觀察，模型組大鼠結腸粘膜出現(xiàn)不完整損傷，明顯充血、水腫，并伴有潰瘍形成，與空白對照組比較大體評分增高(P＜0.05)。丁氏潰結灌腸液各組及美沙拉秦灌腸液組大鼠結腸粘膜損傷后得以修復，僅出現(xiàn)了充血、水腫、輕度糜爛，未見到明顯的潰瘍形成，與模型組比較大體評分下降(P＜0.05)。
　　3、光鏡下觀察，模

5、型組大鼠結腸粘膜損傷后出現(xiàn)壞死脫落，伴發(fā)不同程度的潰瘍灶，大量炎癥性細胞浸潤，粘膜腺體被破壞，排列稀疏紊亂，甚至缺如，并有程度不一的擴張，與空白對照組大鼠比較病理評分顯著增加(P＜0.01)。丁氏潰結灌腸液各組和美沙拉秦灌腸液組大鼠結腸粘膜未有明顯的潰瘍形成，粘膜水腫充血和炎癥細胞浸潤減少，與模型組比較病理評分明顯的降低(P＜0.01)。
　　4、模型組大鼠血清IgA含量、結腸組織Occludin蛋白表達水平，與空白對照組相比顯著

6、下降(P＜0.05)，經丁氏潰結灌腸液及美沙拉秦灌腸液治療后，各組血清IgA含量、結腸組織Occludin蛋白表達水平升高，與模型組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。
　　5、模型組大鼠結腸組織iNOS mRNA的表達水平，與空白對照組比較明顯的升高(P＜0.01)，經丁氏潰結灌腸液和美沙拉秦灌腸液治療后，各組iNOS mRNA的表達呈下降趨勢，與模型組比較有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。模型組大鼠結腸組織MUC2 mRNA的表達水

7、平，與空白對照組比較明顯的減低(P＜0.01)，經丁氏潰結灌腸液和美沙拉秦灌腸液治療后，MUC2 mRNA的表達水平顯示升高，與模型組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。在mRNA表達水平上的比較，丁氏潰結灌腸液中高劑量組與美沙拉秦灌腸液組之間無明顯差異。
　　結論:1、丁氏潰結灌腸液對DSS誘導的UC有一定治療作用，可有效減輕其大便不成形、便血、體重下降等癥狀，使腸粘膜組織炎癥好轉，降低DAI評分和大體、病理評分。2、對于DSS誘