睪丸酮從毛單胞功S44在重金屬銻壓力下的比較蛋白質組學研究.pdf

1、銻(Sb)作為一種重要的重金屬元素，廣泛存在于土壤和水生生態(tài)系統(tǒng)中。雖然銻長期被用于利什曼原蟲病的治療，但是人們并沒有忽視銻對于人類的危害（對心臟和肝臟的損傷等）和對環(huán)境的污染。中國是世界上銻資源最為豐富的國家，也是銻需求量最大的國家，同時中國的銻污染也尤為嚴重。目前已經(jīng)有報道許多微生物對于重金屬銻具有抗性和氧化作用，但是關于其抗性機制和氧化機制的研究非常少。Comamonas testosteroni S44是本實驗發(fā)現(xiàn)的一株銻抗性和

2、氧化菌株，C.testosteroni S44對銻的抗性MIC為300μmol/L，并且能在3天內把50μmol的酒石酸銻鉀完全氧化完。微生物蛋白質組學是對微生物體內代謝活動相關的蛋白質進行研究和鑒定，蛋白質組學研究的高通量特點決定了它能夠深入的闡釋脅迫條件下微生物適應環(huán)境多樣性的機制，因此相當一部分微生物蛋白質組學的研究都集中在微生物脅迫生理方面。本實驗首次利用微生物蛋白質組學的方法研究C.testosteroniS44在重金屬銻脅迫

3、下的相關代謝活動。
　　 本文在銻抗性微生物C.testosteroni S44對銻的抗性機制的蛋白質組學研究中，通過對雙向電泳結果分析，選取了87個表達量差異在兩倍及以上的蛋白點進行質譜鑒定，最終成功鑒定出57種蛋白（除去鑒定失敗的和不同點鑒定為同一種蛋白的情況），根據(jù)KEGG功能分類:參與各種類型代謝的蛋白質與酶類59％，參與各種遺傳信號轉導的蛋白質25％，與環(huán)境信息傳遞相關的蛋白占12％，功能未明確的未分類蛋白4％。通過結

4、果分析我們發(fā)現(xiàn)：⑴表達量升高的蛋白占鑒定出總蛋白的63.2％；⑵抗性和應激相關蛋白表達量發(fā)生變化以增加對Sb(Ⅲ)的抵抗能量和減少Sb(Ⅲ)帶來的對細胞組分的破壞；⑶參與糖代謝的蛋白質和酶類大部分表達量都是升高的；⑷蛋白質翻譯和氨基酸代謝水平普遍增高；⑸脂肪酸代謝的增強和PHB相關酶類的表達量變化表明細胞內能量儲存和釋放都增加；⑹與能量相關蛋白的表達量變化證明細胞內涉及底物水平磷酸化的酶表達量上升了，氧化磷酸化的酶表達量下降了?？偟膩碚f