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文檔簡介
1、目的:
構建固醇調節(jié)元件結合蛋白裂解激活蛋白(SREBP cleavage activating protein,SCAP)腺病毒,探討其對ATDC5軟骨干細胞增殖及凋亡的影響。為進一步研究SCAP基因的生物學功能奠定基礎,也為探討SCAP介導的脂代謝與骨關節(jié)炎的關系提供一定的實驗基礎和理論依據(jù)。
方法:
應用 AdEasyTM腺病毒載體系統(tǒng),構建并包裝 Ad-SCAP和靶向SCAP的siRNA腺病毒siS
2、CAP1和siSCAP2,RT-PCR和Western blot法檢測其在 ATDC5細胞中的表達。FCM檢測 SCAP重組腺病毒對ATDC5細胞增殖和凋亡的影響; Western blot檢測SCAP重組腺病毒感染ATDC5細胞時,凋亡相關蛋白Cleaved Caspase-3, p-JNK的表達。
結果:
成功構建重組腺病毒 Ad-SCAP和 Ad-siSCAP;Ad-SCAP處理組ATDC5細胞凋亡率明顯增加(
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