低強(qiáng)度脈沖超聲對(duì)離體大鼠膀胱平滑肌收縮的影響及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制的研究.pdf

1、第一部分低強(qiáng)度脈沖超聲對(duì)離體大鼠膀胱平滑肌收縮的影響
　　目的:
　　通過觀察低強(qiáng)度脈沖超聲（LIPUS）對(duì)離體大鼠膀胱平滑肌收縮的影響，討論LIPUS是否可為產(chǎn)后尿潴留提供一種新的治療方法，并初步探討其影響機(jī)制。
　　方法:
　　1、制備32段SD雌性大鼠膀胱平滑肌肌條；
　　2、根據(jù)不同處理?xiàng)l件將肌條隨機(jī)分為超聲輻照組、超聲輻照+尼莫地平組（L-型鈣通道阻滯劑）、超聲輻照+低分子肝素組（IP3受體拮抗劑

2、）及對(duì)照組；
　　3、采取BL-410F機(jī)能系統(tǒng)測(cè)量并記錄超聲輻照組、超聲輻照＋尼莫地平組、超聲輻照＋低分子肝素組的膀胱肌條在低強(qiáng)度脈沖超聲輻照前、后的收縮曲線圖，并比較各組膀胱肌條收縮的頻率和幅度；
　　4、收集對(duì)照組和超聲輻照組輻照后的膀胱平滑肌組織，通過石蠟包埋、切片、HE染色，然后在顯微鏡下觀察其組織病理學(xué)變化。
　　結(jié)果:
　　1、與LIPUS輻照前比較，超聲輻照組的膀胱肌條在LIPUS輻照后的收縮頻率

3、和幅度明顯增加(P<0.05)；
　　2、超聲輻照＋L-型鈣通道阻滯劑的膀胱肌條的收縮頻率和幅度明顯降低(P<0.05)；
　　3、超聲輻照＋I(xiàn)P3受體拮抗劑的膀胱肌條的收縮頻率和幅度無明顯變化(P>0.05)。
　　4、組織病理學(xué)觀察結(jié)果揭示了超聲輻照組與對(duì)照組的膀胱平滑肌細(xì)胞無明顯差異。
　　結(jié)論:
　　膀胱平滑肌細(xì)胞膜上的L-型鈣通道可被低強(qiáng)度脈沖超聲激活，從而引起離體大鼠膀胱平滑肌的收縮幅度和頻率增

4、加。
　　第二部分低強(qiáng)度脈沖超聲影響膀胱平滑肌收縮的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制研究
　　目的:
　　探究LIPUS是否通過L-型鈣通道激活的鈣離子信號(hào)通路來增加細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度引起膀胱平滑肌收縮增強(qiáng)。
　　方法:
　　用酶消化法提取膀胱平滑肌原代細(xì)胞，并用其特異性抗體a-Actin染色鑒定；CCK-8試劑盒分別檢測(cè)不同超聲強(qiáng)度（0.5 W/cm2，1.0 W/cm2，1.5 W/cm2）及不同作用時(shí)間（10s、20s、

5、30s、40s、50s）下的細(xì)胞生存率；使用倒置熒光顯微鏡及流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)對(duì)照組、超聲輻照組、尼莫地平組、尼莫地平+超聲輻照組細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)度及濃度情況。
　　結(jié)果:
　　膀胱平滑肌細(xì)胞（BSMcs）提取并鑒定成功；0.5 W/cm2的超聲輻照強(qiáng)度，作用時(shí)間20s時(shí)，細(xì)胞生存率在90％以上，后續(xù)研究采用0.5 W/cm2，20s作為BSMcs的超聲輻照強(qiáng)度與時(shí)間；與對(duì)照組相比較，超聲輻照組BSMcs內(nèi)Ca2+熒光強(qiáng)