鹽芥RAV基因家族在擬南芥中的過(guò)量表達(dá)及功能驗(yàn)證.pdf

1、鹽芥鹽芥RAV基因家族在基因家族在擬南芥擬南芥中的過(guò)量表達(dá)及功能驗(yàn)證表達(dá)及功能驗(yàn)證OverexpressionFunctionalVerificationThellungiellasalsugineaRAVGeneFamilyinTransgenicArabidopsis學(xué)科專(zhuān)業(yè)：遺傳學(xué)研究生：羅翠指導(dǎo)教師：楊少輝副教授天津大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院二零一六年五月摘要RAV（RelatedtoABI3VP1）轉(zhuǎn)錄因子含有AP2結(jié)構(gòu)域和B3結(jié)

2、構(gòu)域，是高等植物體內(nèi)具有多種功能的一類(lèi)轉(zhuǎn)錄因子。盡管RAV基因家族在棉花、大豆和擬南芥等多種植物中已有一定程度的研究，但對(duì)鹽生模式植物鹽芥RAV基因家族的研究尚且沒(méi)有。本文分離得到了鹽芥全基因組中的8個(gè)TsRAV基因，并根據(jù)生物信息學(xué)分析將其分成兩組（A組，B組），A組成員為T(mén)sRAV1TsRAV4，B組成員為T(mén)sRAV5TsRAV8。實(shí)時(shí)定量分析發(fā)現(xiàn)鹽芥種子播種后0d到4d過(guò)程中8個(gè)TsRAV表達(dá)水平一直呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。通過(guò)對(duì)鹽芥幼苗進(jìn)

3、行NaCl和ABA脅迫處理，分別分析根和葉中的TsRAV基因表達(dá)水平發(fā)現(xiàn)，ATsRAVs基因中TsRAV2、TsRAV3的表達(dá)受到NaCl明顯的抑制，BTsRAVs（TsRAV5TsRAV8）的表達(dá)水平極低且對(duì)NaCl脅迫不敏感；鹽芥ATsRAVs基因和BTsRAVs基因?qū)BA脅迫的應(yīng)答不同，外源ABA抑制了TsRAV1、2、3基因的表達(dá)；而B(niǎo)TsRAVs基因雖然在無(wú)ABA脅迫時(shí)表達(dá)量極低，但是在葉中還是受到ABA短暫的誘導(dǎo)，表達(dá)量出

4、現(xiàn)瞬時(shí)增長(zhǎng)。對(duì)35S:TsRAVs轉(zhuǎn)基因擬南芥在NaCl、ABA及干旱脅迫下的應(yīng)答進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn)，隨著NaCl濃度的增加，35S:TsRAVs轉(zhuǎn)基因株系受到的抑制越來(lái)越顯著，且在不同鹽濃度下35S:ATsRAVs（35S:TsRAV1TsRAV4）株系發(fā)芽率均低于35S:BTsRAVs（35S:TsRAV5TsRAV8）株系；外源ABA對(duì)35S:TsRAVs株系種子萌發(fā)起抑制作用，且35S:ATsRAVs株系受到的抑制程度較35S:BTs

5、RAVs株系更強(qiáng)；野生型（WT）、35S:ATsRAVs及35S:BTsRAVs株系幼苗在根的生長(zhǎng)方面受外源ABA的抑制程度無(wú)顯著差異；由于35S:ATsRAVs株系在0.5μMABA脅迫環(huán)境中黃子葉較WT和BTsRAVs株系多，推測(cè)ATsRAVs基因可能與ABA調(diào)控的光合作用和葉片衰老相關(guān)；35S:ATsRAVs株系在干旱條件下，影響氣孔的關(guān)閉活動(dòng)，因此推測(cè)ATsRAVs（TsRAV1TsRAV4）基因是植物生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的負(fù)調(diào)節(jié)因子