A藥治療鼻炎的動物實驗研究.pdf

1、變應(yīng)性鼻炎是耳鼻咽喉科常見的疾病之一，流行病學(xué)研究表明，變應(yīng)性鼻炎的發(fā)病率在全球呈現(xiàn)出上升趨勢。該疾病對患者生活、學(xué)習(xí)以及工作都有明顯影響，特別是在睡眠、情緒及記憶方面，對合并有變應(yīng)性鼻炎的哮喘患者，將導(dǎo)致其癥狀加劇，給患者造成巨大的痛苦和經(jīng)濟負擔(dān)。在此背景下，對準(zhǔn)確診治變應(yīng)性鼻炎的要求也日益提高，本課題選擇A藥為研究對象，它是純中藥制劑，可疏風(fēng)清熱、通鼻竅。臨床上主要用于治療急慢性鼻炎、變應(yīng)性鼻炎和鼻竇炎等疾病，具有明顯的療效。

2、>　　目的：
　　依據(jù) A藥的功能主治，通過設(shè)計動物實驗對該顆粒劑的安全性、主要藥效學(xué)以及抗變應(yīng)性鼻炎作用機制進行相關(guān)研究，為保證 A藥臨床使用的安全、有效、合理，擬對其進行急性毒性、抗炎鎮(zhèn)痛、抗菌、抗過敏反應(yīng)等進行動物實驗研究，從而對A藥的安全性和有效性進行客觀性評價，為開發(fā)出一個適用急慢性鼻炎、變應(yīng)性鼻炎、鼻竇炎的醫(yī)院制劑提供依據(jù)。
　　方法：
　　（1）安全性實驗：選取30只小鼠隨機分成對照組和給藥組，分別觀察各

3、組小鼠的外觀性狀、行為活動、精神狀態(tài)、呼吸和飲食情況，觀察A藥的急性毒性，同時測定出A藥的最大劑量。
　?。?）主要藥效學(xué)實驗：①鎮(zhèn)痛作用：選用熱板法和醋酸致小鼠扭體法觀察A藥的鎮(zhèn)痛效果；②抗炎作用：選取二甲苯致小鼠耳廓腫脹模型和角叉菜膠致大鼠足趾腫脹模型來研究 A藥對急性炎癥的相關(guān)作用；選取大鼠棉球肉芽腫模型來探究A藥對慢性炎癥的效果；③選用脂多糖誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷模型，研究A藥對急性肺損傷小鼠的保護作用；④通過體內(nèi)抗菌實驗，觀

4、察A藥抗菌作用。
　　（3）抗變應(yīng)性鼻炎的作用及作用機制：①建立豚鼠變應(yīng)性鼻炎模型，觀察其行為學(xué)特征，研究A藥對致敏豚鼠的作用；②通過HE法染色法，觀察鼻黏膜組織的炎性細胞浸潤情況和組織水腫情況，探究A藥對改善鼻黏膜組織病理表現(xiàn)的作用；③采用ELISA法測定血清中IL-4和SIgE含量，從而評價A藥對炎癥因子的影響作用；④通過免疫組化法檢測鼻黏膜組織中TNF-α、SP、Bax以及VCAM-1的表達情況，研究A藥對其表達的影響。

5、r>　　結(jié)果：
　?。?）安全性實驗：A藥的最大劑量為25 mg/g，實驗過程中，各組小鼠的外觀特征及行為活動均正常，呼吸均勻，精神狀態(tài)及飲水飲食都未見異常，沒有出現(xiàn)毒性反應(yīng)。
　?。?）藥效學(xué)實驗：①鎮(zhèn)痛作用：A藥高劑量(15.5 mg/g)在受到熱刺激1h后可明顯減輕疼痛到80.64％（p<0.01），2h的鎮(zhèn)痛百分率高達到91.09%（p<0.01）；A藥中劑量（7.75 mg/g）和高劑量（15.5 mg/g）可明顯

6、減少小鼠扭體次數(shù)達42.85%（p<0.05）和53.46%（p<0.01）；②抗炎作用：研究表明A藥中劑量（7.75 mg/g, p<0.05）和高劑量（15.5 mg/g, p<0.01）可明顯緩解小鼠的耳廓腫脹程度；A藥高中低三個劑量（2.68 mg/g,5.35 mg/g,10.7 mg/g）抑制棉球?qū)е碌娜庋拷M織增生，抑制率分別為32.62%，45.13%（p<0.01）和60.68%（p<0.001）；A藥中劑量（5.35m

7、g/g）和高劑量（10.7 mg/g）在注射角叉菜膠5h后可顯著減輕大鼠足趾腫脹程度達34.8%（p<0.05）和37.9%（p<0.05）；③A藥的高劑量和中劑量可以有效降低急性肺損傷小鼠的肺干濕重，同時有效改善肺組織的組織水腫和炎性細胞浸潤，表明 A藥可保護脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷小鼠；④抗菌作用：A藥可保護感染金黃色葡萄球菌的小鼠，減少死亡率。
　?。?）抗變應(yīng)性鼻炎的作用及作用機制：①A藥中劑量（7.75mg/g）和高劑量（

8、15.5mg/g）可明顯減少變應(yīng)性鼻炎豚鼠的行為學(xué)表現(xiàn)，緩解動物鼻癢、噴嚏及流涕現(xiàn)象；②A藥中劑量（7.75mg/g）和高劑量（15.5mg/g）可顯著減少炎性細胞浸潤情況和組織水腫面積，有效改善鼻黏膜組織病理變化；③A藥中劑量（7.75mg/g）和高劑量（15.5mg/g）可顯著降低變應(yīng)性豚鼠血清中IL-4和SIgE含量，起到下調(diào)炎癥因子的作用；④A藥中劑量（7.75mg/g）和高劑量（15.5mg/g）可減少變應(yīng)性豚鼠鼻黏膜組織中T

9、NF-α、SP以及VCAM-1的表達，同時增強Bax表達。
　　結(jié)論：
　?。?）安全性實驗：A藥在25mg/g時未出現(xiàn)明顯毒性反應(yīng)，而且各組小鼠外觀，行為，呼吸，精神狀態(tài)以及飲食都是正常的。
　?。?）藥效學(xué)實驗：①鎮(zhèn)痛作用：表明A藥具有明顯的鎮(zhèn)痛作用；②抗炎作用：A藥具有較強的抗急性鼻炎和慢性鼻炎作用；③A藥對急性肺損傷小鼠具有良好的保護作用；④抗菌作用：A藥具有有效的體內(nèi)抗菌作用。
　?。?）抗變應(yīng)性鼻炎的