BMP9在誘導(dǎo)MEFs骨分化過(guò)程中促進(jìn)Wnt-β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與COX-2的關(guān)系研究.pdf

1、骨不連接及大段骨缺損是臨床常見的骨科疾病，目前的臨床治療方法尚不能有效地治療。組織工程骨是治療這類疾病最理想的方式，但這種治療方式仍需有效解決成骨支架、種子細(xì)胞和成骨誘導(dǎo)因子等問(wèn)題。骨形態(tài)蛋白9（BMP9）具有高效誘導(dǎo)干細(xì)胞骨向分化的能力，具有很好的臨床應(yīng)用前景。本研究在課題組前期工作的基礎(chǔ)上，進(jìn)一步分析COX-2促進(jìn)BMP9誘導(dǎo)干細(xì)胞骨分化的可能機(jī)制。
　　本研究采用RT-PCR、Western blot、細(xì)胞免疫熒光染色、堿性

2、磷酸酶（ALP）組化染色、茜素紅S染色、周期分析、螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒及ChIP等實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行相關(guān)研究。首先，本研究進(jìn)一步確認(rèn)BMP9對(duì)干細(xì)胞骨向分化的誘導(dǎo)作用；然后分析BMP9對(duì)COX-2表達(dá)的影響，以及COX-2影響B(tài)MP9誘導(dǎo)干細(xì)胞骨分化作用與PGE2/EPs途徑的關(guān)系；最后，分析BMP9骨分化誘導(dǎo)作用中促進(jìn)Wnt/β-catenin信號(hào)與COX-2的關(guān)系。結(jié)果顯示，BMP9能明顯誘導(dǎo)MEFs骨分化，并同時(shí)誘導(dǎo)COX-2表達(dá)；抑制CO

3、X-2則減弱BMP9的骨向分化誘導(dǎo)作用；BMP9明顯升高PGE2的蛋白水平，抑制PGE2受體（EP2或EP4）均抑制BMP9的作用；其中，抑制EP4受體對(duì)BMP9作用的影響更明顯；COX-2對(duì)BMP9成骨誘導(dǎo)作用的影響可能與抑制細(xì)胞增殖無(wú)關(guān)。BMP9能增加Wnt/β-catenin信號(hào)的轉(zhuǎn)導(dǎo)活性，過(guò)表達(dá)COX-2能增強(qiáng)這種作用，而抑制COX-2則減弱 BMP9對(duì)該信號(hào)的促進(jìn)作用；抑制EPs受體和cAMP同樣減弱BMP9對(duì)Wnt/β-ca