牛黃上清片的比較藥代動力學(xué)及組織分布研究.pdf

1、牛黃上清片是中醫(yī)治療實熱證的經(jīng)典方劑，具有清熱瀉火，散風(fēng)止痛的功效，臨床上主要用于頭痛眩暈，目赤耳鳴，咽喉腫痛，口舌生瘡，牙齦腫痛，大便燥結(jié)。主要是由人工牛黃、薄荷、菊花、荊芥穗、白芷、川芎、梔子、黃連、黃柏、黃芩、大黃、連翹、赤芍、當(dāng)歸、地黃、桔梗、甘草、石膏以及冰片十九味中草藥按照“君、臣、佐、使”原則配伍制成。其在生物體內(nèi)的藥代動力學(xué)及主要活性成分在體內(nèi)的分布及代謝規(guī)律目前還未有文獻報道，藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明確。為此，本課題對其藥代動

2、力學(xué)進行比較研究，并分析其在生物體內(nèi)的分布情況和代謝途徑，為闡明牛黃上清片的作用機理和藥效物質(zhì)基礎(chǔ)奠定基礎(chǔ)。
　　首次采用HPLC法，以Inertsil?ODS-3 column(150 mm×4.6 mm,5 um,GL Scie nce,Japa n)為色譜柱，流動相為甲醇-0.2％磷酸（80:20）；流速：1.0 mL/min；檢測波長：254 nm；柱溫：25℃；進樣體積：10μL；進樣時間：20 min；內(nèi)標(biāo)：1，8-二

3、羥基蒽醌。對復(fù)方制劑牛黃上清片，單味藥材大黃及單體化合物大黃酸在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)進行研究，比較大黃酸在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)參數(shù)。實驗結(jié)果表明，在相當(dāng)劑量下牛黃上清片中大黃酸的藥動學(xué)參數(shù)與大黃提取物及大黃酸單體相比，均有顯著性差異（P＜0.05）。牛黃上清片中大黃酸的血藥濃度Cmax（NHSQA：2.462 mg/L;NHSQ B：1.903 mg/L;NHSQC：2.922 mg/L）遠大于大黃提取物中大黃酸的Cmax（1.116

4、mg/L）及大黃酸對照品的Cmax（0.662 mg/L），而牛黃上清片中大黃酸達到最大血藥濃度的時間Tmax（NHSQA：0.236 h;NHSQB：0.333 h;NHSQC：0.264 h）又比大黃提取物Tmax（0.542 h）及大黃酸對照品Tmax（0.958 h）的短。此外，牛黃上清片在大鼠體內(nèi)的AUC值（NHSQA：7.105 mg/L*h；NHSQB：8.616 mg/L*h；NHSQC：8.385 mg/L*h）遠大于

5、大黃提取物的AUC（4.518 mg/L*h）和大黃酸的AUC（2.395 mg/L*h）。
　　本課題首次采用UHPLC-Q-TOF-MS/MS技術(shù)在正、負離子兩種模式下對牛黃上清片體外提取物及主要活性成分在大鼠體內(nèi)（腦、心、肝臟、腎臟、血液、尿液）的吸收分布和代謝進行研究。結(jié)合Peak View?軟件分析鑒定出211個體外提取物，135個體內(nèi)原型成分和154個代謝物產(chǎn)物。其中體外提取物中的43個是根據(jù)對照品完全鑒定，其余的依據(jù)

6、文獻和裂解規(guī)律為暫時鑒定。135個原型成分中，血漿樣品中91個，腦組織中31個，心組織中50個，肝臟組織中55個，腎臟組織中52個以及尿樣中93個。此外，代謝物也分布于大鼠的各個組織，其中有五個代謝產(chǎn)物（M50,M79,M115,M128和M154）是首次發(fā)現(xiàn)的目前未有文獻報道的新代謝物質(zhì)。實驗結(jié)果表明，牛黃上清片的主要活性成分及代謝物存在于生物的各組織中，且代謝主要以Ⅱ相代謝反應(yīng)（葡萄糖醛酸化、甲基化、硫酸酯化）為主。本實驗比較全面的