2007年春季和秋季北黃海微型浮游生物豐度調(diào)查分析及兩種微型硅藻的分離鑒定.pdf

1、(一) 2007年春季和秋季對(duì)北黃海水域(120°34′E-124°03′E,32°00′N-39°23′N)微型浮游生物豐度進(jìn)行調(diào)查,其中春季78個(gè)站位,秋季80個(gè)站位,對(duì)微型浮游生物豐度在水平分布,垂晝夜變化和種類組成進(jìn)行了分析。春季北黃海水域微型浮游生物豐度變化范圍為(5.01cells/ml～91.87cells/ml)平均值為29.50 cells/ml.秋季變化范圍為(4.70 cells/ml～151.73 cells/m

2、l),平均值為34.15 cells/ml;在水平分布上,山東半島,遼東半島的近岸和北黃海暖流經(jīng)過(guò)的海域豐度較高,達(dá)到90cells/ml。種類組成上,兩個(gè)季節(jié)主要為硅藻甲藻組成,也有少數(shù)的藍(lán)藻、綠藻出現(xiàn)。在晝夜變化上,春季和秋季表現(xiàn)出相似的趨勢(shì),表層和10米層在中午12:00-14:00出現(xiàn)峰值,30米層和底層水深的豐度分布相對(duì)較均勻,變化不大,沒(méi)有明顯的峰值出現(xiàn)。利用多元相關(guān)分析可知,春季微型浮游生物豐度與環(huán)境參數(shù)有相關(guān)性但并不顯著

3、,而秋季微型浮游生物豐度與溫度呈顯著的正相關(guān),與水深呈顯著的負(fù)相關(guān),與鹽度相關(guān)性不顯著。
　　 (二)采用96孔板有限稀釋分離培養(yǎng)的方法,一將采自青島太平角的1株微型藻類純化,對(duì)其進(jìn)行光鏡和電鏡觀察,與纖細(xì)角毛藻(Chaetoceros gracilis)在光鏡下無(wú)法區(qū)分,電鏡下只有角毛結(jié)構(gòu)稍有差異,故從形態(tài)上初步鑒定為角毛藻屬(Chaetoceros sp.qd)藻類。角毛每隔0.5μm左右有一互生的刺狀突起,頂端呈錐狀,其網(wǎng)

4、狀骨架主干呈螺旋狀,延伸至頂端,骨架之間有橫隔相連,形成小孔結(jié)構(gòu)。擴(kuò)增其18S核糖體基因(18SrDNA),由測(cè)序結(jié)果得知C.sp.qd的18S序列部分長(zhǎng)度為1623bp,經(jīng)BLAST比對(duì)后得到C.sp.qa與Chaetoceros gracilis strain UTEX LB 2375的18SrDNA相似值最高,達(dá)到99％,確定為角毛藻屬的微藻。然后擴(kuò)增5.8S核糖體基因(5.8SrDNA)和轉(zhuǎn)錄單元內(nèi)間隔區(qū)(Internal Tr

5、anscribed Spacer,ITS)序列,5.8SrDNA-ITS的序列總長(zhǎng)度為837bp。比對(duì)后可知此種5.8S區(qū)與角毛藻屬相似度很高,達(dá)到99％,但I(xiàn)TS區(qū)差別較大。系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)以及遺傳距離分析顯示此藻種與其他角毛藻種有顯著差異,在進(jìn)化樹(shù)中單獨(dú)分支,結(jié)合形態(tài)學(xué)分析將C.sp.qd鑒定為一角毛藻新種.
　　 (三)采用96孔板有限稀釋分離培養(yǎng)的方法,將采自青島太平角的1株微型藻類純化,對(duì)其進(jìn)行光鏡和電鏡觀察,與艾倫海鏈藻(

6、Thalassiosira allenii)和具毛海鏈藻(Thalassiosira hispida)在光鏡下無(wú)法區(qū)分,在電鏡下與艾倫海鏈藻殼緣支持突數(shù)量上不同,與具毛海鏈藻在孔紋數(shù)量上也有差異。故從形態(tài)上初步鑒定為海鏈藻屬(Thalassiosira sp.qd)藻類。擴(kuò)增其18S核糖體基因(18SrDNA),由測(cè)序結(jié)果得知T.sp.qd的18S序列部分長(zhǎng)度為1640bp,使用硅藻門(mén)13個(gè)不同屬的18S與本種構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)可知,本種

7、與海鏈藻屬的藻類聚群,節(jié)點(diǎn)支持率為98,故確定為海鏈藻屬的微藻。然后擴(kuò)增5.8S核糖體基因(5.8SrDNA)和轉(zhuǎn)錄單元內(nèi)間隔區(qū)(Internal Transcribed Spacer,ITS)序列,5.8SrDNA-ITS的序列總長(zhǎng)度為762bp。比對(duì)后可知此種5.8S區(qū)與海鏈藻屬相似度很高,達(dá)到99％,但I(xiàn)TS區(qū)差別較大。在屬內(nèi)種間的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)以及遺傳距離分析顯示此藻種與其他海鏈藻種有顯著差異,在進(jìn)化樹(shù)中單獨(dú)分支,顯示此藻種可能為一