SOD3改善Aβ25-35誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞氧化損傷.pdf

1、目的：本研究旨在探討SOD3過表達(dá)在 AD體外細(xì)胞模型中的作用以及 SOD3能否通過影響線粒體凋亡途徑改善 Aβ25-35誘導(dǎo)的SH-SY5Y氧化損傷，為治療AD提供新思路。
　　方法：我們選用Aβ25-35誘導(dǎo)SH-SY5Y細(xì)胞建立AD體外細(xì)胞模型，并用包裹了SOD3的腺病毒感染SH-SY5Y細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)分為三組（對照組、Aβ25-35組、SOD3組）進(jìn)行以下檢測：細(xì)胞活力、細(xì)胞內(nèi)活性氧（ROS）的產(chǎn)生、抗氧化酶的表達(dá)和活性、脂質(zhì)

2、過氧化水平的丙二醛（MDA）以及線粒體凋亡相關(guān)基因的表達(dá)和細(xì)胞內(nèi)鈣濃度等。
　　結(jié)果：（1）細(xì)胞活性檢測結(jié)果表明：與對照組相比，Aβ25-35組細(xì)胞活性明顯降低（p<0.01）；而SOD3組細(xì)胞活性增強(qiáng)（p<0.01）。
　?。?）活性氧檢測結(jié)果顯示：與對照組相比，Aβ25-35組細(xì)胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生顯著升高（p<0.01）；與Aβ25-35組相比，SOD3組細(xì)胞內(nèi)活性氧產(chǎn)生顯著減少（p<0.05）。
　　（3）細(xì)胞上清液

3、中抗氧化酶活性及 MDA水平檢測結(jié)果顯示：Aβ25-35組抗氧化酶活性較對照組顯著降低（T-SOD, p<0.01;GPx, p<0.01;CAT, p<0.01），MDA水平升高（p<0.01）；與Aβ25-35組相比，SOD3組抗氧化酶活性有不同程度的升高（T-SOD, p<0.01; GPx, p<0.01; CAT, p<0.05），MDA水平明顯降低（p<0.01）。
　?。?）半定量 PCR檢測細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶基因結(jié)果顯

4、示：與對照組相比，Aβ25-35組抗氧化酶基因表達(dá)有不同程度的減少（SOD1, p<0.01;SOD2, p<0.01;GPx, p<0.01;CAT, p<0.01）；與Aβ25-35組相比，SOD3組細(xì)胞內(nèi)抗氧化酶基因呈現(xiàn)不同程度的升高（ SOD1, p<0.01; SOD2, p<0.01;GPx, p<0.01;CAT, p<0.01）。
　?。?）半定量 PCR檢測細(xì)胞內(nèi)線粒體凋亡相關(guān)基因結(jié)果表明：與對照組相比，Aβ25

5、-35組Cytochrome c, Caspase-3, Caspase-9及Bax表達(dá)上調(diào)，而Bcl-2表達(dá)下調(diào)；與Aβ25-35組相比，SOD3組Cytochrome c, Caspase-3, Caspase-9及Bax表達(dá)下調(diào)，而Bcl-2表達(dá)上調(diào)。
　　（6）Ca2+水平檢測結(jié)果顯示：與對照組相比，Aβ25-35組細(xì)胞內(nèi)Ca2+水平顯著增高（p<0.01）；與Aβ25-35組相比，SOD3組鈣離子水平明顯降低（p<0.0