制何首烏的化學(xué)成分研究.pdf

1、中藥何首烏為蓼科Polygonaceae蓼屬Polygonum植物何首烏 Polygonum multiflorum Thunb.的干燥塊根，具有解毒，消癰，截瘧，潤(rùn)腸通便等功效，臨床上用于瘡癰，瘰疬，風(fēng)疹瘙癢，久瘧體虛，腸燥便秘；中藥制何首烏為ω何首烏的炮制加工品，可補(bǔ)肝腎，益精血，烏須發(fā)，強(qiáng)筋骨，用于血虛萎黃，眩暈耳鳴，須發(fā)早白，腰膝酸軟，肢體麻木，崩漏帶下，久瘧體虛；高血脂。為進(jìn)一步明確炮制對(duì)何首烏化學(xué)成分的影響，我們對(duì)制何首烏進(jìn)

2、行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究并對(duì)炮制前后何首烏的HPLC圖譜進(jìn)行了比較分析。
　　運(yùn)用溶劑萃取，各種柱層析及重結(jié)晶等方法，從制何首烏乙醇提取物中共分離得到35個(gè)單體化合物，并綜合運(yùn)用物理化學(xué)方法，特別是現(xiàn)代波譜學(xué)技術(shù)，包括一維和二維核磁共振、圓二色譜、高分辨質(zhì)譜等，鑒定了其中29個(gè)化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，分別為：ω-羥基大黃素（PMPE-1）、蘆薈大黃素（PMPE-2）、鄰苯三酚（PMPE-3）、胡蘿卜苷（PMPE-4）、大黃素-8-O-β-

3、D-葡萄吡喃糖苷（PMPE-5）、2，3，5，4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（PMPE-6）、兒茶素（PMPE-7）、2，3，5，4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-（6"-乙酰基）-葡萄吡喃糖苷（PMPE-8）、2，3，5，4'-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-（2"-沒食子酰基）-葡萄吡喃糖苷（PMPE-9）、沒食子酸（PMPE-10）、穆坪馬兜鈴酰胺（PMPE-11）、polygonumoside A（PMP

4、B30-1）、何首烏乙素（PMPB30-2）、Polygonumoside D（PMPB30-3）、Polygonumoside C（PMPB30-4）、2,3,5,4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-6"-（α-D-葡萄吡喃糖基）-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-7）、何首烏丙素（PMPB30-8）、Polygonumoside B（PMPB30-11）、大黃素甲醚-8-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-12）、苜蓿素-7-O-β

5、-D-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-13）、正丁基果糖苷（PMPB30-14）、表兒茶素（PMPB30-16）、2-（2-羥丙基）-5-甲基色原酮-7-O-β-D-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-18）、南燭木樹脂酚-3?-O-?-D-葡萄吡喃糖苷（PMPB30-19）、Polygonumoside E（PMPB30-20）、大黃素甲醚（PMPC-1）、大黃素（PMPC-2）、2,5-二甲基-7-羥基色原酮（PMPC-3）、谷甾醇（PMPP-

6、1）。
　　以上化合物中，PMPB30-1、PMPB30-3、PMPB30-4、PMPB30-11、PMPB30-20這五個(gè)化合物為新化合物，其中PMPB30-1與PMPB30-11為一對(duì)非對(duì)映異構(gòu)體，擁有一個(gè)新的2H-苯并[c]呋喃[2,3-f]色原-7(3H)-酮的母核骨架；PMPB30-3與PMPB30-4也是一對(duì)非對(duì)映異構(gòu)體，是首次從何首烏中分離得到的二苯乙烯二聚體。PMPC-3、PMPE-3、PMPB30-13、PMPB

7、30-18這四個(gè)化合物為首次從何首烏中分離得到。其中PMPB30-20、PMPC-3和PMPB30-18是首次從何首烏中分離得到的色原酮類化合物。
　　經(jīng)對(duì)比炮制前后何首烏HPLC圖譜，我們發(fā)現(xiàn)，何首烏經(jīng)黑豆汁法炮制后，二苯乙烯苷 PMPE-6（2，3，5，4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄吡喃糖苷）含量有所下降，而其他二苯乙烯類化合物PMPE-8、PMPE-9和PMPE30-8以及新化合物polygonumosides

8、A-D的含量均有所升高，以PMPE-8、PMPE-9含量升高較為明顯，說明在炮制過程中，二苯乙烯苷PMPE-6發(fā)生了化學(xué)變化，如在葡萄糖上發(fā)生了乙?；驔]食子酰化；蒽醌類化合物PMPC-2與PMPE-1含量有所升高，而 PMPC-1含量有所下降，但游離型蒽醌總含量有所升高，結(jié)合型蒽醌PMPE-5的含量遠(yuǎn)低于其苷元PMPC-2且在炮制后含量降低，表明炮制后結(jié)合型蒽醌會(huì)轉(zhuǎn)化為游離蒽醌。
　　我們對(duì)分離得到的部分化合物進(jìn)行了植物雌激素活

9、性篩選和體外抗氧化活性篩選，結(jié)果顯示PMPE-7（10-5M）可激動(dòng)ER?和ER?轉(zhuǎn)錄活性，對(duì)受體亞型無明顯選擇性；蒽醌類化合物PMPC-2，PMPE-1，PMPE-2，PMPE-5，均在高濃度10-6M才表現(xiàn)出明顯的激活受體轉(zhuǎn)錄活性，且無受體選擇性；二苯乙烯苷PMPE-6在10-7~10-4mol/L濃度下能分別激活雌激素?及?受體，并呈現(xiàn)出劑量依賴性，且對(duì)?受體的激活強(qiáng)于?，但均弱于陽(yáng)性對(duì)照雌二醇。以上各化合物對(duì)雌激素受體激活作用均