膀胱癌中TERT啟動(dòng)子突變分析及復(fù)發(fā)的意義.pdf

1、目的:膀胱腫瘤(Tumor of bladder)是泌尿生殖腫瘤中最常見(jiàn)的，最常見(jiàn)的病理類(lèi)型是尿路移行上皮細(xì)胞癌，具有多發(fā)、易復(fù)發(fā)的特點(diǎn)。在我國(guó)膀胱腫瘤是泌尿系統(tǒng)最常見(jiàn)的腫瘤，近年來(lái)的發(fā)病率在全世界范圍內(nèi)呈逐漸上升趨勢(shì)。近年發(fā)現(xiàn)的與惡性腫瘤相關(guān)性最強(qiáng)的分子生物學(xué)指標(biāo)是端粒酶活性。端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶（TERT)啟動(dòng)子區(qū)突變不存在于正常人類(lèi)受試者和公共基因數(shù)據(jù)庫(kù)中，通過(guò)惡性腫瘤特異性體細(xì)胞遺傳改變的表現(xiàn)，進(jìn)一步支持了其在人類(lèi)腫瘤發(fā)展中的作用。T

2、ERT啟動(dòng)子突變可以通過(guò)增強(qiáng)結(jié)合ETS轉(zhuǎn)錄因子的能力來(lái)增強(qiáng)端粒酶催化亞基的表達(dá)。它可能顯示一個(gè)新的機(jī)制，同時(shí)這一發(fā)現(xiàn)與以前對(duì)某些人類(lèi)癌癥中端粒酶活性的觀察結(jié)果相一致。有研究發(fā)現(xiàn)在包括膀胱癌和尿路上皮癌在內(nèi)的數(shù)種惡性腫瘤中均存在TERT啟動(dòng)子突變，這些重要研究結(jié)果充分證明了端粒酶在癌癥的致癌機(jī)制上起著非同尋常的作用。TERT在膀胱腫瘤中的表達(dá)與其較低的預(yù)后和較高的復(fù)發(fā)率密切相關(guān)。本研究通過(guò)對(duì)膀胱癌組織進(jìn)行的基因突變篩查，探討TERT啟動(dòng)子

3、區(qū)突變與膀胱癌復(fù)發(fā)及腫瘤特征之間的關(guān)系。
　　方法:隨機(jī)在泌尿外科手術(shù)室取外科手術(shù)后2h內(nèi)未添加福爾馬林或其他添加成分的癌組織標(biāo)本及癌旁大于2cm以上的組織，于-80°保存，提取癌組織及癌旁組織DNA后，通過(guò)PCR技術(shù)對(duì)其TERT啟動(dòng)子區(qū)域進(jìn)行擴(kuò)增，然后應(yīng)用Sanger測(cè)序分析TERT啟動(dòng)子突變位點(diǎn)。結(jié)果通過(guò)卡方檢驗(yàn)證明其與膀胱癌腫瘤分期、分級(jí)及復(fù)發(fā)率是否相關(guān)。
　　結(jié)果:對(duì)成功擴(kuò)增的71例標(biāo)本進(jìn)行突變分析，對(duì)45/47例患

4、者成功隨訪，通過(guò)卡方檢驗(yàn):經(jīng)電切后的膀胱癌復(fù)發(fā)率與TERT啟動(dòng)子突變陽(yáng)性有明顯差異(x2=7.7471，P=0.024，P＜0.05)，證明TERT啟動(dòng)子區(qū)域突變與膀胱癌的發(fā)生率有明顯相關(guān)性(P＜0.05)，但與腫瘤分期、分級(jí)無(wú)差異性（P＞0.05），用人時(shí)為單位計(jì)算膀胱癌復(fù)發(fā)的發(fā)病密度，結(jié)果顯示經(jīng)電切后的膀胱癌患者術(shù)后復(fù)發(fā)密度與TERT啟動(dòng)子突變陽(yáng)性有明顯差異(x2=10.8178，P＜0.05)，證明TERT啟動(dòng)子區(qū)域突變率越高與電