肝素寡糖與β-淀粉樣蛋白相互作用的核磁共振研究.pdf

1、阿爾茲海默癥（Alzheimer's disease，AD）是一種進(jìn)行性發(fā)展的神經(jīng)功能障礙性疾病，老年人是其主要的發(fā)病人群。隨著人口老齡化情況加劇，阿爾茲海默癥已經(jīng)逐漸成為嚴(yán)重危害老年人健康的常見病。β-淀粉樣蛋白(β-amyloid peptide，Aβ)是AD病理性標(biāo)志淀粉樣斑塊的重要組成部分，tau蛋白是神經(jīng)元纖維纏結(jié)(neurofibrillary tangles，NFTs)的主要組成部分，而淀粉樣斑塊和NFTs是神經(jīng)病理學(xué)診斷

2、AD的標(biāo)準(zhǔn)。但是，NFTs在很多神經(jīng)退行性疾病中觀察到，因此，β-淀粉樣蛋白成為研究AD的主要物質(zhì)。人類終身產(chǎn)生Aβ，它是一種正常的生理代謝產(chǎn)物，其不正常的病理變化是引發(fā)AD的重要原因。
　　研究發(fā)現(xiàn)，糖胺聚糖(glycosaminoglycan，GAG)介導(dǎo)了Aβ的聚集并導(dǎo)致神經(jīng)毒性的發(fā)生，硫酸化的GAG能夠有效促進(jìn)Aβ的纖維化聚集，并且穩(wěn)定已形成的老年斑，但是未硫酸化的透明質(zhì)酸(hyaluronic acid, HA)不能夠促

3、進(jìn)Aβ聚集。而肝素寡糖與Aβ結(jié)合可以有效的抑制Aβ的聚集并減少其神經(jīng)毒性。肝素寡糖不具有毒性且能夠通過血腦屏障(blood brain barrier, BBB)直接作用于Aβ。肝素寡糖混合物C3是一種低分子肝素(low molecular weight heparin，LMWH)衍生物，它是一種Sβ聚集抑制劑，已在臨床治療中應(yīng)用。然而該藥物是一種混合物，由于肝素可以與近百種蛋白質(zhì)相互作用并發(fā)揮不同的生理活性，混合物可能存在潛在的副作用

4、，因此，需進(jìn)一步明確研究肝素寡糖與Aβ之間相互作用的構(gòu)效關(guān)系。
　　本課題旨在研究不同硫酸化程度及硫酸化位點(diǎn)的肝素寡糖與Aβ之間的相互作用的差異性，從分子水平上研究明確結(jié)構(gòu)的寡糖與Aβ40結(jié)合的構(gòu)效關(guān)系。運(yùn)用質(zhì)譜（mass spectrum，MS）和核磁共振波譜(nuclear magnetic resonance，NMR)分析方法分別對(duì)制備的三種肝素四糖dp4-1、dp4-3、dp4-4和市售的磺達(dá)肝癸鈉（肝素五糖片段）進(jìn)行了結(jié)

5、構(gòu)表征，確定了三種肝素四糖結(jié)構(gòu)分別為:△UA2S(1→4)GlcNS6S(1→4)IdoA2S(1→4)GlcNS△UA2S(1→4)GlcNS6S(1→4)GlcA(1→4)GlcNS6S,△UA2S(1→4)GlcNS6S(1→4)IdoA2S(1→4)GlcNS6S，五糖的結(jié)構(gòu)為 GlcNS6S(1→4)GlcA(1→4)GlcNS3 S6S(1→4)IdoA2S(1→4)GlcNS6SOMe。利用凝膠遷移速率分析(gel mob